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研究人员为优化黑鲷(Acanthopagrus schlegelii)MSCs 分离富集培养,找到有效方法,为相关应用奠基。
肌肉干细胞(MSCs)在肌肉生长、修复和再生过程中发挥着关键作用,在细胞介导疗法、组织工程以及替代食品生产等领域具有潜在应用价值。尽管从哺乳动物组织中分离和富集 MSCs 的研究已取得显著进展,但针对鱼类 MSCs 的研究却较为有限。本研究旨在建立一套优化的黑鲷(
Acanthopagrus schlegelii)MSCs 分离、富集和扩增方案,以便用于潜在的生物技术应用。
研究人员利用多种酶对黑鲷的骨骼肌组织进行酶解分离,发现 II 型胶原酶和链霉蛋白酶的组合在细胞分离和去除组织碎片方面最为有效。通过在 I 型胶原上进行差异贴壁(DP),能够有效富集 MSCs,这一结论可由非贴壁细胞中Pax7基因表达显著增加得以证明。在测试的多种黏附底物中,基质胶(Matrigel)包被的培养皿最有利于维持富集后的 MSCs 并支持其分化潜能,能够促使大量肌管形成。
考虑到 Matrigel 成本较高,研究人员在细胞早期传代后将其转移至层粘连蛋白或明胶包被的培养皿中培养。值得注意的是,在 Matrigel 中培养过的细胞在这些更具成本效益的底物上仍能保持存活和分化能力。在明胶包被的培养皿中长期培养后,细胞系能够稳定维持超过 25 代,并且它们的成肌分化潜能也得到了良好的保留,不过不同细胞系之间存在一定差异。
这些研究结果为鱼类 MSCs 的高效分离、富集和培养提供了基础框架,有助于开发可扩展且具有成本效益的方案,推动其在肌肉生物学和生物技术领域的应用发展。