快速检测果树病毒的两步法逆转录多重 PCR 技术

为检测果树病毒，研究人员开发两步法逆转录多重 PCR（RT - 多重 PCR），灵敏且无假阳性。

　　病毒会降低果树的果实产量和品质，给果园带来巨大的经济损失。在感染葡萄（Vitis spp.）和李属植物（Prunus spp.）的病毒中，香石竹环斑病毒、桃丛簇花叶病毒、树莓环斑病毒、草莓潜环斑病毒、藜花叶病毒和葡萄脉黄病毒（番茄环斑病毒）在日本均被列为植物检疫性病原菌。虽然这些病毒可以通过在藜（Chenopodium quinoa）上进行汁液接种来筛选，但仅依据症状很难鉴定病毒种类。有几种诊断检测方法可用于诊断植物中的病毒感染，然而，总体而言，聚合酶链式反应（PCR）是最常用的方法。特别是多重 PCR 能够在一次检测中同时检测多个目标，从而降低成本、人力和时间。因此，基于病毒遗传多样性的可靠 PCR 诊断方法对于检测果园中的病毒感染至关重要。在本研究中，研究人员利用新设计的引物组，开发了一种两步法逆转录（RT）- 多重 PCR 技术，用于快速且经济高效地检测上述六种感染藜的病毒。研究人员根据从 NCBI 数据库获得的所有序列数据，为每种病毒变体设计了引物。该检测方法的灵敏度与之前报道的单重 RT-PCR 检测方法相当，甚至比其高 1 - 10000 倍，且具有无任何非特异性反应的优势。该检测方法将有助于鉴定和筛选健康的苗木，以及用于植物检疫检查。