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为解决培养肉生产难题,研究人员开发昆虫细胞系 MsNACs,其营养成分与鸡胚成纤维细胞相似,具重要意义。
# 昆虫细胞:培养肉生产的新希望?
在当今时代,人们对肉类的需求与日俱增,传统畜牧业面临着诸多挑战。一方面,传统动物农业对环境造成了巨大压力,如大量的温室气体排放、土地资源的过度占用等;另一方面,动物福利问题也备受关注,同时,肉类生产过程中的食品安全隐患也威胁着人类健康。在这样的背景下,培养肉(Cultivated meat,CM)技术应运而生,它致力于通过细胞培养的方式生产肉类,而无需养殖整只动物,为解决上述问题带来了新的曙光。
然而,培养肉技术在发展过程中也面临着重重困难。目前,用于培养肉生产的细胞系大多来自牲畜或海鲜物种,这些细胞在培养过程中存在一些问题。例如,动物无成分培养基虽然可用于部分细胞类型,但与含有胎牛血清(Fetal Bovine Serum,FBS)的培养基相比,细胞生长速度较慢;悬浮培养时往往需要使用微载体,这不仅增加了培养的复杂性,还提高了成本;而且,在单细胞悬浮培养中实现高细胞密度,常常依赖于大量使用生长培养基,这无疑增加了生产成本。
为了突破这些瓶颈,来自塔夫茨大学(Tufts University)的研究人员开展了一项极具创新性的研究。他们将目光投向了昆虫细胞,旨在开发一种新型的昆虫细胞系,用于培养肉的生产。研究人员成功建立了一种源自烟草天蛾(Manduca sexta)胚胎的非贴壁昆虫细胞系(Manduca sexta non - adherent cells,MsNACs),并对其进行了全面的表征和分析。该研究成果发表在《Scientific Reports》上,为培养肉技术的发展提供了新的思路和方向。
研究人员在实验过程中运用了多种关键技术方法。首先是细胞分离技术,他们从烟草天蛾胚胎中分离出细胞,并通过一系列操作获得非贴壁细胞。接着,进行血清无培养基适应和非贴壁细胞选择,使细胞逐渐适应无动物成分的培养基。此外,还运用了细胞培养技术,在不同的培养容器中培养细胞,包括摇瓶和生物反应器。同时,采用了多种分析技术,如通过对细胞生长曲线、代谢产物分析以及营养成分分析等,深入了解细胞的生长特性和营养组成。
研究结果
- MsNACs 细胞系的建立与特性:研究人员成功从烟草天蛾胚胎中分离出细胞,并经过多次筛选和培养,获得了能够在无动物成分培养基中自发永生化且稳定生长的 MsNACs 细胞系。这些细胞在超过 100 次传代后仍保持稳定的生长速率,并且在冷冻保存后,经过复苏和传代,其生长特性和细胞活力与冷冻前相比无显著差异。
- MsNACs 在不同培养条件下的生长表现:MsNACs 在摇瓶培养中表现出色,在进行培养基更换的情况下,细胞密度可超过 2000 万个 /mL。在批次培养(不更换培养基)时,细胞在 7 天内平均可达到 434±77 万个 /mL,且细胞活力始终保持在 92% 以上。此外,研究人员还对 MsNACs 在生物反应器中的培养进行了探索,发现其在 2.4 升生物反应器中能够生长,尽管细胞活力相对摇瓶培养略低,但仍能维持在 80% 以上,细胞密度与摇瓶培养相似。同时,MsNACs 也成功在 10 升生物反应器中生长,不过生长速度比预期慢,这表明在大规模培养条件下,通过进一步优化培养条件,有望提高细胞的生长效率。
- MsNACs 的代谢分析:通过对 MsNACs 培养过程中废弃培养基的分析,研究人员发现了一些有趣的现象。在 7 天的培养过程中,尽管培养基中含有较高浓度的葡萄糖(约 9g/L),但细胞并未消耗葡萄糖,且乳酸产生量极少,这表明 MsNACs 的能量代谢途径可能与常见的昆虫细胞系不同。此外,研究人员还发现,谷氨酸在培养过程中几乎被耗尽,而谷氨酰胺的消耗较少,但氨的产生量却显著增加。通过向培养基中添加不同浓度的乳酸和氨,研究人员发现 MsNACs 对乳酸的耐受性较高,但氨浓度过高会显著抑制细胞生长。这表明氨的积累可能是导致 MsNACs 在高细胞密度下生长缓慢的重要原因之一。
- MsNACs 的营养成分分析:对 MsNACs 进行初步的营养成分分析后发现,其干重组成中蛋白质含量为 77.47±2.2%,脂肪含量为 13.53±2.27%,灰分含量为 8.1±1.51%,碳水化合物含量为 0.92±0.1%。MsNACs 含有所有九种必需氨基酸,并且与目前美国食品药品监督管理局(FDA)和美国农业部(USDA)批准的用于培养肉生产的胚胎鸡成纤维细胞(DF - 1 细胞)相比,MsNACs 在某些矿物质含量上具有优势,如铁和钙的含量显著更高。不过,在氨基酸组成方面,MsNACs 与 DF - 1 细胞存在一些差异,例如 MsNACs 中赖氨酸、苏氨酸和缬氨酸的比例显著低于 DF - 1 细胞,而蛋氨酸的比例则显著高于 DF - 1 细胞。
研究结论与讨论
这项研究成功开发了一种可在无动物成分培养基中生长、适应单细胞悬浮培养且自发永生化的昆虫细胞系 MsNACs,为培养肉的大规模生产提供了新的细胞来源。MsNACs 的营养成分与胚胎鸡成纤维细胞相似,这表明其在培养肉生产中具有潜在的应用价值。然而,目前 MsNACs 的生长速度在高细胞密度下仍有待提高,未来可以通过优化培养基配方、进行基因工程改造或克隆分离等方法来进一步优化细胞的生长特性。此外,还需要对 MsNACs 营养成分的生物利用度进行更深入的研究,以确定其作为培养肉成分的实际效果。同时,消费者对昆虫细胞培养肉的接受度也是一个需要关注的问题,未来需要开展相关研究来评估消费者的态度,并探索合适的营销策略,以促进昆虫细胞培养肉的市场推广。
总的来说,该研究为培养肉技术的发展提供了重要的理论依据和实践基础,尽管目前还面临一些挑战,但昆虫细胞在培养肉生产中的潜力巨大,有望为未来的肉类生产带来新的变革。