XPO1抑制剂联合地西他滨治疗 T 细胞淋巴母细胞淋巴瘤的新突破

为解决 T-LBL 治疗难题，研究人员探究 XPO1抑制剂与地西他滨联合疗效，发现二者协同抗癌，提供新治疗选择。

　　T 细胞淋巴母细胞淋巴瘤（T-LBL）是一种起源于前体 T 淋巴细胞的罕见侵袭性非霍奇金淋巴瘤，大多 “偏爱” 男性儿童和青少年，还常常 “侵犯” 纵隔、骨髓和中枢神经系统。尽管医学在进步，但 T-LBL 患者的预后情况仍不理想，5 年生存率不到 20% ，复发难治性（RR）T-LBL 患者的长期生存率更是低于 10%。而且，目前二线治疗方案尚无定论，国内也缺乏有效的治疗药物，因此，探寻新的治疗方法迫在眉睫。

郑州大学第一附属医院、郑州大学第一临床医学院以及河南省淋巴瘤诊疗中心的研究人员，开展了关于 XPO₁抑制剂塞利尼索（Selinexor）联合地西他滨（Decitabine）治疗 T-LBL 的研究。他们发现，这两种药物联合使用在体外和体内都展现出显著的协同效应，为 RR T-LBL 患者带来了新的治疗希望。该研究成果发表在《Annals of Hematology》杂志上。

为了开展这项研究，研究人员运用了多种关键技术方法。细胞实验方面，选用 Jurkat、Molt-3 和 Sup-T1 细胞系进行培养 。通过 CCK-8 实验检测细胞增殖，用流式细胞术分析细胞凋亡和细胞周期。在分子机制探究上，采用 mRNA 测序筛选差异表达基因，利用定量实时荧光定量 PCR（qRT-PCR）和蛋白质免疫印迹法（Western blotting）检测基因和蛋白表达水平。此外，构建人肿瘤异种移植模型，在动物水平评估药物疗效。

下面来看具体的研究结果：

1. 单药对 T-LBL 细胞系的抑制作用：研究人员检测细胞活力，探究塞利尼索或地西他滨单药的抑制效果。将 Jurkat、Molt-3 和 Sup-T1 细胞分别暴露于不同浓度的两种药物中不同时间，结果显示地西他滨以剂量和时间依赖的方式抑制 T-LBL 细胞生长，塞利尼索也有类似效果，且二者效果相当，还得出了不同细胞系在 72 小时的半数抑制浓度（IC₅₀）值。
2. 联合治疗的协同效应：为评估联合治疗的抗癌活性，让 T-LBL 细胞先用地西他滨处理 24 小时，再用塞利尼索处理 48 小时。根据 Chou-Talalay 方法计算组合指数（CI），结果表明该联合治疗具有协同作用，并确定了不同细胞系进一步实验的最佳协同浓度。
3. 联合治疗促进细胞凋亡：通过流式细胞术分析联合治疗诱导的细胞凋亡程度，发现联合治疗使 Jurkat、Molt-3 和 Sup-T1 细胞的总体凋亡率显著增加，远超单药治疗。进一步检测凋亡相关蛋白水平，证实联合治疗显著增加了切割的 PARP、切割的 caspase 9、切割的 caspase 7 和切割的 caspase 3 等蛋白水平。
4. 联合治疗通过细胞周期 G₀/G₁期阻滞增强抗癌效果：流式细胞术检测发现，联合治疗使 Jurkat、Molt-3 和 Sup-T1 细胞系中 G₀/G₁期细胞比例显著增加，S 期细胞比例相应减少。同时，通过 Western blotting 检测发现，细胞周期 G₀/G₁进程中起重要调节作用的蛋白 CyclinD1、CDK4 和 CDK6 表达下降，与细胞周期阻滞结果一致。
5. SLIT2 介导联合治疗的抗肿瘤作用：进行 mRNA 测序探索联合治疗协同效应的潜在机制，发现了一系列差异表达基因和信号通路，其中 SLIT2 基因引起关注。研究发现地西他滨处理可增加 T-LBL 细胞系中 SLIT2 在 RNA 和蛋白水平的表达，联合塞利尼索处理后效果更明显。
6. 联合治疗在体内抑制 T-LBL 生长：利用 Jurkat 细胞系构建裸鼠异种移植模型，将小鼠分组并给予不同处理。结果显示，与对照组相比，联合治疗组肿瘤体积和重量明显减小，Ki-67 染色强度减弱，SLIT2 表达增加，证明联合治疗在体内也具有协同抗癌效果。

研究结论和讨论部分指出，T-LBL 预后差，缺乏标准化挽救治疗方案，现有治疗手段有限。本研究首次探究塞利尼索和地西他滨联合治疗 T-LBL 的效果，结果表明二者联合显著抑制 T-LBL 细胞增殖、促进凋亡、诱导细胞周期阻滞，动物实验也证实了联合治疗的有效性。研究还发现 SLIT2 可能介导了联合治疗的协同抗 T-LBL 作用，推测地西他滨通过抑制 DNA 甲基化上调 SLIT2 表达，塞利尼索通过阻断其核转运进一步增加表达，从而发挥抗癌作用，但这一假设还需进一步研究验证。总之，该研究为 T-LBL 的治疗提供了新的理论依据和潜在治疗方案，不过还需要在临床患者中进一步验证其效果，为 T-LBL 患者带来更多治愈的希望。