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研究人员针对牛结节性皮肤病病毒(LSDV)开展研究,揭示其诊断与防控成果,为疫病防治提供关键依据。
牛结节性皮肤病(Lumpy skin disease,LSD)是一种对畜牧业危害极大的病毒性传染病,其幕后 “元凶” 是牛结节性皮肤病病毒(LSDV)。这种病毒就像一个 “隐藏杀手”,在非洲、中东和亚洲等地广泛传播,自 1988 年现身埃及后,便不断兴风作浪。它主要通过吸血昆虫传播,给牛群带来了沉重的灾难。感染后的牛不仅会出现高烧、皮肤结节、淋巴结肿大等症状,还会面临生长发育受阻、繁殖能力下降等问题,严重影响了肉类和奶制品的生产,让养殖户们苦不堪言。
面对 LSDV 带来的严峻挑战,来自埃及国家研究中心兽医研究所寄生虫学和动物疾病系的研究人员挺身而出,开展了一项意义重大的研究。他们深入探索 LSDV 的诊断方法和疫苗研发,相关成果发表在《Veterinary Research Communications》上。这项研究对于防控 LSDV、保障畜牧业健康发展具有重要意义。
研究人员在此次研究中运用了多种技术方法。在诊断方面,利用病毒分离技术,在临床症状出现的第一周采集样本,从皮肤病变、血液等中分离病毒;借助透射电子显微镜(TEM),能快速确认病毒的存在和形态;运用聚合酶链反应(PCR)、实时荧光定量 PCR(qPCR)等分子检测技术,监测病毒传播。在疫苗研究中,通过动物实验评估不同疫苗的免疫效果,如观察接种疫苗后动物的抗体产生情况、对病毒攻击的抵抗力等 。
研究结果如下:
- LSDV 的诊断
- 临床诊断:LSD 的发病率差异较大,在 5% - 45% 之间,有时甚至可达 100%,但死亡率通常低于 10%。其临床症状多样,潜伏期为 1 - 4 周,感染动物会出现发热、精神萎靡等症状。典型症状包括高烧(体温>40.5°C)、皮肤出现直径 10 - 50mm 的结节,这些结节还会经历一系列变化,从丘疹、水疱发展为脓疱,最后结痂。此外,还会伴有流泪、流鼻涕、淋巴结肿大、产奶量下降等症状,严重时可引发肺炎、流产、不孕不育等并发症。
- 实验室诊断:病理检查发现,病死牛的肺、胃肠道有水肿、充血和结节,浅表淋巴结肿大,组织病理变化主要为表皮层的棘层肥厚、空泡变性等。病毒鉴定方面,病毒分离可从皮肤活检、血液等样本中进行,牛真皮细胞 OA3.Ts 等是适合病毒生长的细胞。分子检测方法中,PCR 和 qPCR 是常用的检测手段,PCR 可检测 Capripoxvirus 的 DNA,但难以区分 LSDV、SPPV 和 GTPV,而 qPCR 速度更快、灵敏度更高;测序和系统发育分析则能区分这三种病毒;环介导等温扩增(LAMP)在一些缺乏精密仪器的农场具有应用潜力。血清学检测中,病毒中和试验(VNT)和酶联免疫吸附试验(ELISA)是常用方法,其中 VNT 是检测 LSDV 抗体的金标准,ELISA 则具有操作简便、可高通量检测等优点 。
- LSDV 的疫苗研究
- 活疫苗:活疫苗是通过对病毒进行减毒处理获得的。Neethling 疫苗是常见的 LSDV 活疫苗,其保护效力较高,接种后约一个月可提供完全保护,但部分家畜接种后会出现不良反应,如克罗地亚超过 1% 的家畜接种后有不良反应,埃塞俄比亚的 Neethling 疫苗甚至无法有效保护家畜。此外,羊痘和山羊痘疫苗也被用于 LSD 的防控,但不同疫苗的效果差异较大,且在无羊痘和山羊痘的国家使用可能存在风险 。
- 活载体疫苗:重组载体疫苗是对活病毒疫苗进行改造,使其表达外源抗原以激发免疫反应。基于 LSDV 的双价或多价载体疫苗具有诸多优势,如成本效益高、可区分感染和接种动物等。例如,LSD - 裂谷热病毒(RVFV)双价疫苗在实验室和现场试验中都表现出了良好的保护效果 。
- 灭活疫苗:灭活疫苗是通过物理、化学或生物方法将病毒灭活,使其失去感染性和毒力,但仍能刺激机体产生免疫反应。此类疫苗生产成本低、开发周期短,但通常需要加强免疫。研究表明,不同的疫苗佐剂可增强灭活疫苗的效果,不过,灭活疫苗诱导的免疫反应相对较窄,主要是体液免疫,细胞免疫和黏膜免疫反应较弱 。
- 重组修饰活病毒疫苗:科学家通过定向突变或删除病毒的毒力基因,构建重组减毒株作为疫苗。例如,在羊痘研究中,发现 Kelch - like 基因 SPPV - 019 可使病毒毒力减弱,基于此构建的重组活疫苗在反刍动物中具有潜在应用价值 。
研究结论与讨论部分指出,在临床应用中,应根据疾病的不同阶段选择合适的诊断方法。早期感染时,现代分子技术灵敏度高,抗体检测也可辅助诊断;症状明显时,典型病理变化有助于鉴别诊断。同时,防控 LSD 需要综合采取多种措施,包括消毒、免疫、控制传播媒介、隔离病畜等。目前的疫苗研究虽取得了一定成果,但仍需开发更安全有效的新型疫苗。未来的研究方向将聚焦于阻断病毒传播途径、实施大规模安全有效的疫苗接种策略以及优化诊断方法等方面,这对于全球畜牧业的健康发展至关重要,有望为解决 LSD 带来的难题提供新的思路和方法,保障畜牧业的稳定和繁荣。