番茄叶卷曲新德里病毒（ToLCNDV）关键蛋白抑制 RNA 沉默活性研究成果揭示

为探究 ToLCNDV 蛋白的 RNA 沉默抑制活性，研究人员开展相关研究，发现 AV2 抑制活性更高。

　　双生病毒科（Geminiviridae）的菜豆金色花叶病毒属（Begomoviruses）是主要的植物病原体，会导致重要农作物严重减产，对全球农业构成重大威胁。它们的单链 DNA（ssDNA）基因组至少编码三种抑制蛋白，即 AV2/V2（前衣壳蛋白）、AC2/C2（转录激活蛋白）和 AC4 蛋白，这些蛋白会在宿主 RNA 沉默途径的不同步骤进行干扰，从而引发疾病。和其他菜豆金色花叶病毒属病毒一样，番茄叶卷曲新德里病毒（ToLCNDV）也含有这三个基因。然而，这些蛋白的抑制活性尚未得到研究。为了评估病毒蛋白抑制 RNA 沉默的能力，研究人员将假定的抑制蛋白与报告基因共表达，通过报告基因表达的恢复情况来确定抑制蛋白的活性。在本研究中，研究人员通过 GUS 报告基因检测法，对 ToLCNDV 的 AV2/AC2/AC4 蛋白的 RNA 沉默抑制活性进行了研究。在这三种蛋白中，AV2 相比 AC2 和 AC4 蛋白表现出更高的抑制活性。随后，研究人员通过定量逆转录聚合酶链式反应（qRT-PCR）对这三种蛋白的抑制活性进行了量化。为了开发一种基于 qRT-PCR 定量的替代方法，研究人员还描述了一种基于图像的定量检测方法，其结果与 qRT-PCR 相当。<没有需要继续补充的内容，已按照要求完整输出。>