发酵乳杆菌混合菌株无细胞上清液对产肠毒素大肠杆菌的抗菌作用研究

研究人员评估发酵乳杆菌（Limosilactobacillus fermentum）混合菌株的 CFS 和活细胞对 ETEC 的抗菌效果，发现 CFS 有效。

　　本研究探究了发酵乳杆菌（Limosilactobacillus fermentum）139、296 和 263 混合菌株的无细胞上清液（cell-free supernatant，CFS）以及活细胞的抗菌功效。这些菌株是益生菌的候选菌株，研究人员针对 5 种 ST_b毒型产肠毒素大肠杆菌（enterotoxigenic Escherichia coli，ETEC）菌株对其进行了评估。采用点琼脂法测定发酵乳杆菌混合细胞和 CFS 的拮抗活性。评估 CFS 对实验室培养基中活菌数、生物膜形成、细胞表面疏水性、黏蛋白以及运动性的影响。运用平板计数法测定 CFS 在实验室培养基中以及在模拟胃肠道条件下对 ETEC 活菌数的作用，利用流式细胞术评估发酵乳杆菌细胞的生理状态。借助核磁共振技术鉴定 CFS 中的代谢物及其对 ETEC 代谢物谱的影响。发酵乳杆菌活细胞混合物产生的生长抑制圈（18.4 - 35.8 mm）比 CFS（10.1 - 30.1 mm）更大。暴露 24 小时后，CFS 可使 ETEC 菌株的活菌数减少≥5 log CFU/ml，还能降低 ETEC 菌株的生物膜形成、细胞表面疏水性、黏蛋白含量以及游动和群集运动能力。在模拟胃肠道条件下，添加 CFS 后，ETEC 菌株在最终消化阶段的活菌数＜2 log CFU/ml。暴露于 CFS 导致 80.0% 以上的 ETEC 细胞亚群呈现死亡或受损状态。乳酸和乙酸是 CFS 中最关键的变量，它们促使 ETEC 代谢活性降低。结果表明，所检测的发酵乳杆菌 139、263 和 296 混合菌株的 CFS 是一种有效的抗 ETEC 抗菌剂。