mRNA 脂质纳米颗粒（LNPs）制备与评估的简易指南：助力 mRNA 疗法发展

研究人员开发出 mRNA LNP 制备、表征及评估的简易指南，降低研究门槛，推动其转化应用。

　　基于 mRNA 的疗法已成为一种用于多种治疗应用的前沿方法。然而，存在大量障碍阻碍科学家进入这一研究领域，包括技术复杂性，以及在制备和评估 mRNA 脂质纳米颗粒（LNPs）时可供选择的多种潜在流程。在此，研究人员提供了一份易于遵循的、分步的指南，用于 mRNA LNP 的制备、表征以及体外和体内评估，这能够降低这些障碍，方便学术界、工业界和临床环境中的科学家进入这一研究领域。在本实验方案中，详细介绍了制备具有代表性的 mRNA LNPs 的步骤（0.5 天），以及表征关键参数（1 - 6 天）的方法，这些参数包括粒径、多分散指数、ζ 电位、mRNA 浓度、mRNA 包封率和稳定性。随后，描述了体外评估（3 - 6 天），例如蛋白质表达、细胞摄取以及机制研究（3 - 5 天），其中包括内体逃逸；还介绍了体内递送评估（2 - 3 天），涵盖细胞内和分泌蛋白表达水平、生物分布以及额外的耐受性研究（1 - 2 周）。与一些可能仅关注流程中某个离散方面（如制备、表征或评估）的替代方案不同，该实验方案旨在将这些方面整合为一个适用于多种类型 mRNA LNP 制备的简化单一流程。在描述这些程序时，研究人员希望传播一种用于 mRNA LNP 生产和评估的潜在流程，最终目标是促进 mRNA LNPs 的创新、合作和转化进展。