血浆游离 DNA 助力甲状旁腺肿瘤术前诊断：开启精准医疗新篇章

为鉴别甲状旁腺癌（PC）与甲状旁腺腺瘤（PA），研究人员检测患者血浆 cfDNA 突变，发现可助于术前诊断 PC。

　　

甲状旁腺肿瘤诊断困境：精准医疗的挑战

在人体的内分泌系统中，甲状旁腺虽小，却发挥着至关重要的作用。当甲状旁腺组织出现异常，引发原发性甲状旁腺功能亢进症（PHPT）时，会对人体健康产生严重影响。甲状旁腺腺瘤（PA）和甲状旁腺癌（PC）是导致 PHPT 的常见原因，其中 PA 约占 85%，PC 虽仅占 1 - 5%，但其恶性程度高，预后差，约 60% 的 PC 患者会出现复发和转移。

对于 PHPT 患者，手术是主要治疗手段。然而，术前精准区分 PA 和 PC 极为关键，因为这直接关系到手术范围的确定。但目前，临床面临着巨大挑战。PA 和 PC 的临床特征存在诸多重叠，仅依靠可触及的颈部肿块、血清甲状旁腺激素（PTH）水平、高钙血症等指标进行鉴别诊断并不准确，PC 术前常被误诊为 PA。此外，经皮细针穿刺活检虽广泛应用于其他肿瘤的术前诊断，但由于甲状旁腺肿瘤的特殊风险，并不适用。因此，寻找一种可靠的术前鉴别诊断方法迫在眉睫。

近年来，血浆游离 DNA（cfDNA）在肿瘤诊断领域崭露头角，为甲状旁腺肿瘤的诊断带来了新希望。在此背景下，中国医学科学院北京协和医院的研究人员开展了一项重要研究，相关成果发表在《Cancer Cell International》杂志上，为甲状旁腺肿瘤的诊断和治疗开辟了新方向。

研究方法：开启探索之旅的钥匙

研究人员为解决甲状旁腺肿瘤术前诊断难题，进行了一项回顾性研究。他们从北京协和医院选取了 31 例患者，其中 18 例为 PC 患者，13 例为 PA 患者。这些患者在 2016 - 2022 年间接受手术治疗，所有诊断均依据 WHO 分类标准，并经两位内分泌病理学家确认。

在实验技术方面，研究人员运用了多种先进手段。首先是下一代测序（NGS）技术，对血浆 cfDNA 进行深度检测，同时以匹配的外周血白细胞 DNA 作为对照。通过特定的基因 panel，对血浆 cfDNA 进行提取、纯化、文库制备和测序，全面分析其中的基因突变情况。其次，针对肿瘤组织，研究人员采用全外显子测序（WES）或免疫组化（IHC）染色的方法，检测 CDC73 基因的突变状态和 parafibromin 蛋白的表达情况。最后，利用统计分析软件，评估 cfDNA 突变对预测肿瘤组织中 CDC73 状态及鉴别甲状旁腺肿瘤良恶性的能力。

研究结果：曙光初现的突破

1. 患者临床特征：研究纳入的 31 例患者中，女性 27 例，男性 4 例，平均年龄 48.6 ± 12.3 岁。PC 组和 PA 组在性别、年龄、身体质量指数（BMI）以及血液中 PTH、钙、碱性磷酸酶（ALP）、磷、肌酐等指标上，均未发现显著差异。在随访过程中，15 例 PC 患者出现复发或转移。
2. cfDNA 的基因突变与浓度：PC 组血浆 cfDNA 平均浓度略高于 PA 组，但差异无统计学意义。对 cfDNA 的测序分析显示，两组在总测序读数和有效测序深度上也无显著差异。进一步分析发现，每个血浆样本的 cfDNA 中平均存在 9.5 个基因的 28.7 个变异，但两组在突变基因变异和基因突变数量上并无显著差异。
3. 肿瘤组织中 CDC73 突变状态：在 30 例有肿瘤组织样本的患者中，17 例 PC 患者中有 10 例检测到 CDC73 异常（包括基因变异和 parafibromin 染色缺失），而 13 例 PA 患者均未检测到 CDC73 异常，两组差异显著。在这 10 例 PC 患者中，6 例存在 CDC73 基因突变，其中 2 例为种系突变，4 例为体细胞突变。
4. cfDNA 预测肿瘤组织中 CDC73 突变状态：在 PA 患者和 PC 患者的 cfDNA 中，分别有 1 例和 12 例检测到 CDC73 突变。在 10 例肿瘤组织存在 CDC73 异常的患者中，8 例 cfDNA 也检测到 CDC73 突变。通过深度测序分析，cfDNA 预测甲状旁腺肿瘤组织中 CDC73 异常的敏感性和特异性均为 80.0%。基于逻辑回归分析，cfDNA 中 CDC73 突变状态可用于预测甲状旁腺肿瘤组织中 CDC73 状态，受试者工作特征曲线下面积（AUC）达到 0.800；当纳入患者年龄和血清 PTH 水平等临床参数时，AUC 提升至 0.935。
5. cfDNA 预测甲状旁腺肿瘤的恶性程度：逻辑回归分析表明，cfDNA 中 CDC73 突变状态是 40 个基因中唯一与患者组织样本中 CDC73 状态相关的突变。利用该突变状态评估甲状旁腺肿瘤的恶性潜能，AUC 为 0.795；纳入年龄等临床参数构建预测模型后，AUC 提高至 0.889，这表明结合临床数据，cfDNA 在鉴别甲状旁腺肿瘤良恶性方面具有重要价值。

研究结论与讨论：迈向精准医疗的新征程

本研究首次通过对血浆 cfDNA 的深度测序，评估甲状旁腺肿瘤的基因突变状态，为术前鉴别 PC 和 PA 提供了新的思路和方法。研究发现，血浆 cfDNA 中 CDC73 异常可有效帮助术前鉴别 PC，为手术决策提供重要依据，有望改善患者的治疗效果和预后。

然而，研究也存在一些局限性。由于 PC 发病率较低，研究样本量有限，可能导致部分生物标志物的意义被低估或高估。此外，研究中未纳入男性 PA 患者样本，且部分血清样本来自复发患者，这可能会给统计分析带来一定偏差。因此，未来需要开展前瞻性研究，进一步验证血浆 cfDNA 在甲状旁腺肿瘤诊断中的价值。

尽管存在挑战，但这项研究无疑为甲状旁腺肿瘤的诊断和治疗带来了新的曙光。随着技术的不断进步和研究的深入，血浆 cfDNA 有望成为甲状旁腺肿瘤术前诊断的重要工具，推动甲状旁腺肿瘤精准医疗的发展，为更多患者带来希望。