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研究人员针对代谢功能障碍相关脂肪性肝病（MASLD）无有效治疗方案问题，研究 lncRNA Gm35585，发现其可改善饮食诱导的脂肪肝，为 MASLD 治疗提供新靶点。
在全球范围内，代谢功能障碍相关脂肪性肝病（MASLD）的患病率正以惊人的速度攀升，它如同一个隐匿在暗处的健康杀手，悄然取代了病毒性肝炎，成为全球第一大慢性肝病。想象一下，无数人的肝脏正遭受着它的侵袭，却缺乏有效的应对之策。由于其发病机制、临床表现和病理变化的复杂性，目前临床上既没有统一的治疗方案，也没有专门针对它的上市药物，现有的治疗手段主要依赖于减肥、饮食控制和运动，这对于深受其害的患者来说，无疑是杯水车薪。因此，探寻 MASLD 的调控机制，开发新的药物靶点，成为了医学领域亟待攻克的难题。
中国药科大学的研究人员勇敢地向这一难题发起挑战，开展了一项极具意义的研究。他们发现了一种名为 Gm35585 的新型长链非编码 RNA（lncRNA），并深入探究了其在调控肝脏脂质积累方面的作用。研究结果令人振奋，Gm35585 可通过激活过氧化物酶 EHHADH 转录，促进过氧化物酶体对长链脂肪酸（LCFAs）的 β- 氧化，最终改善饮食诱导的脂肪肝，这为 MASLD 的治疗提供了全新的理论依据和潜在的治疗靶点。该研究成果发表在《Experimental & Molecular Medicine》杂志上。
为了开展这项研究，研究人员采用了多种关键技术方法。首先，通过构建小鼠和细胞模型，模拟饮食诱导的脂肪肝环境。在小鼠实验中，使用饮食诱导肥胖（DIO）小鼠构建高脂肪饮食（HFD）模型；在细胞实验中，利用 AML-12 细胞系和 HepG2 细胞系建立体外高脂血症模型。其次，运用 RNA 测序技术，分析不同处理组中基因表达的差异，筛选出与脂质代谢相关的关键基因和 lncRNA。此外，还利用染色质免疫沉淀（ChIP）实验、RNA 免疫沉淀（RNA pulldown）实验等，深入探究分子间的相互作用机制，从而揭示 Gm35585 调控脂质代谢的分子机制。
下面让我们详细了解一下研究结果：
- 肝 Gm35585 在 HFD 喂养小鼠中下调：研究人员对正常饮食（NCD）和 HFD 喂养小鼠的肝脏 lncRNA 进行测序，发现 1344 个差异表达的 lncRNA。经分析，FA 降解途径相关的 50 个靶基因中，37 个显著差异表达，进一步确定受这些靶基因调控的 lncRNA，其中 Gm35585 差异表达最为显著。通过数据库搜索和实验验证，发现 Gm35585 主要在肝脏、肺和海马体中高表达，在 HFD 喂养小鼠肝脏中表达下调，且主要位于细胞质中。在体外实验中，转染 pEX-3-Gm35585 质粒后，HepG2 细胞和 AML-12 细胞在棕榈酸（PA）处理下，脂质积累减少，表明外源性 Gm35585 在治疗 HFD 诱导的肝脏脂质积累方面具有潜在作用。
- Gm35585 过表达改善 HFD 诱导的肝细胞脂质积累：研究人员通过尾静脉注射 AAV-Gm35585 载体，使 HFD 喂养小鼠肝脏中 Gm35585 过表达。结果显示，小鼠体重略有下降，肝脏甘油三酯（TG）和总胆固醇（TC）水平显著降低，血清生化指标改善，肝脏脂质滴积累明显减少。同时，诱导 EHHADH 腺相关病毒在 HFD 喂养小鼠肝脏中特异性过表达，发现 EHHADH 过表达可降低血清 AST、TG、TC 和 LDL 水平，减少肝脏脂质滴积累，降低肝脏 TC 和 TG 水平。进一步研究发现，Gm35585 或 EHHADH 过表达可增加肝脏过氧化物酶活性，降低肝脏 LCFAs 水平，而对短链脂肪酸（SCFAs）和中链脂肪酸（MCFAs）水平影响较小。
- Gm35585 通过 PPARα 信号通路激活 EHHADH：研究人员通过 siRNA 沉默 Gm35585 和 EHHADH，以及使用 PPARα 激动剂 GW7647 和抑制剂 GW6471 处理细胞，发现 Gm35585 可通过上调 EHHADH 表达改善脂质积累，PPARα 可调节 EHHADH 参与脂质代谢。此外，通过 RNA pulldown 实验、ChIP 实验和 co-IP 实验等，证实 Gm35585 与 RXRα 结合，促进 PPARα/RXRα 异二聚体形成，增强 RXRα 与 EHHADH 启动子的结合，从而激活 EHHADH 转录。
- Gm35585 诱导 PPARα/RXRα 异二聚体形成促进 EHHADH 转录：通过 RNA FISH 和免疫荧光共染色、RNA pulldown 实验等，发现 Gm35585 与 RXRα 结合，且在 Gm35585 过表达时，RXRα 表达增加，PPARα 与 RXRα 结合形成异二聚体并转移到 EHHADH 启动子区域，促进 EHHADH 转录。使用 siRNA 沉默 RXRα 后，Gm35585 过表达不再上调 EHHADH 表达，脂质含量增加，表明 Gm35585 通过结合 RXRα，促进 PPARα/RXRα 异二聚体形成，上调 EHHADH 表达，减轻肝细胞脂质积累。
在讨论部分，研究人员指出，Gm35585 在脂质代谢中具有重要作用，虽然其在人类中的同源区域较短，但在 HepG2 细胞实验中仍显示出治疗效果，提示外源性 Gm35585 可能用于治疗人类饮食诱导的脂肪肝。此外，EHHADH 作为过氧化物酶体 FAβ- 氧化途径的关键酶，其转录激活可能是调节的唯一途径，Gm35585 有望成为靶向 EHHADH 增强 FAβ- 氧化的潜在小核酸药物。同时，PPARα 在脂质代谢中起重要作用，EHHADH 是其在肝细胞脂质代谢中的主要下游调节因子，而 RXRα 与 Gm35585 的结合及对 EHHADH 的调控机制还有待进一步深入研究。
总的来说，这项研究首次揭示了 Gm35585 调节肝细胞脂质代谢的机制，为 MASLD 的治疗提供了新的治疗策略。然而，目前仍有许多问题需要进一步探索，如 Gm35585 的内源性调节机制、其与其他相关分子的相互作用等。相信随着研究的不断深入，未来将为 MASLD 的治疗带来更多突破，为广大患者带来新的希望。
