利用分子标记筛选甜菜抗丛根病基因型的重要研究

为解决甜菜丛根病（Rhizomania disease）问题，研究人员用 PN1 和 PN3 标记筛选 103 种基因型，确定抗病类型。

　　丛根病（Rhizomania disease）是伊朗及世界部分地区甜菜最重要的病害，严重降低甜菜的糖分产量。对抗这种病害的最佳方法是使用抗病品种。为了在育种计划中利用抗病基因，需要用分子标记对这些基因进行标记。为了在包含 S₁、S₂和 F₂群体的 103 种甜菜基因型中识别抗丛根病的植株，研究人员使用了与丛根病抗性基因连锁的耦合相序列特征扩增区域标记（sequence characterized amplified region marker，SCAR 标记，命名为 PN1）和互斥相随机扩增多态性 DNA 标记（random amplified polymorphic DNA marker，RAPD 标记，命名为 PN3）。从单株甜菜的叶片样本中提取基因组 DNA。接下来，通过随机扩增多态性 DNA 聚合酶链式反应（RAPD-PCR）和特异性聚合酶链式反应（Specific PCR）方法，分别用与 PN1 和 PN3 标记相关的引物对一些单株 DNA 进行检测。扩增产物通过凝胶电泳分离，用溴化乙锭染色，使用凝胶成像仪观察，并根据标记条带的有无进行评分。根据标记数据，发现显性纯合植株的比例在 0 到 92% 之间。O 型编号为 1025、1036、1011、201–20 和 201–25 的植株被确定为最抗病的基因型。因此，在将 PN3 标记转化为特异性 SCAR 标记后，它似乎可以与 PN1 标记一起用于一次双重聚合酶链式反应（duplex PCR reaction），以识别三种基因型（Rz₁Rz₁、Rz₁rz₁和 rz₁rz₁），并筛选源自 Rz₁来源的抗丛根病育种品系和群体。