新型玉米黄斑病毒(MaYMV)研究成果:纯化、抗体开发及检测技术突破

【字体: 时间:2025年03月15日 来源:Archives of Virology 2.5

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  为解决 MaYMV 抗体及血清学诊断空白问题,研究人员开发纯化方法,成果助力病毒检测防控。

  玉米黄斑病毒(Maize yellow mosaic virus,MaYMV)是一种新出现的黄症病毒属病毒,2013 年首次在中国玉米上被报道,此后在非洲和美洲也有发现。由于其新颖性,在本研究之前,针对该病毒没有可用的抗体或血清学诊断方法。在这项研究中,研究人员开发出了首个玉米黄斑病毒纯化方法,旨在制备抗体并开发诊断检测方法。从每千克玉米组织中可获得 0.634 - 1.275 毫克的病毒产量,这与其他感染禾本科植物的黄症病毒属病毒的产量相当。在电子显微镜下,纯化的病毒粒子呈二十面体形状,直径约 30 纳米。研究人员针对梯度纯化的病毒制剂制备了多克隆抗体,并使其与未感染的玉米组织进行交叉吸附。该抗体可通过酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)和蛋白质免疫印迹(western blot)有效检测 MaYMV。ELISA 能够检测低至 0.395 微克的病毒,并且在感染植物提取物 1:32 的稀释液中也能检测到。此外,该抗体与五种密切相关的病毒几乎没有交叉反应。经过蛋白质凝胶电泳和抗体检测,可以看到与两种病毒结构蛋白大小相对应的蛋白条带:约 21 千道尔顿(kDa)的外壳蛋白和大约 72kDa 的通读蛋白。最后,研究发现使用该方案纯化的病毒粒子可由主要蚜虫媒介玉米蚜(Rhopalosiphum maidis)传播,并能导致玉米植株发生系统性、有症状的感染,这表明在纯化过程中病毒粒子的媒介传播性和感染性得以保留。
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