探究胰腺癌中自噬与 Warburg 效应的关系：潜在治疗靶点的探索

为明确胰腺癌（PDAC）中自噬与 Warburg 效应的关系，研究人员开展实验，揭示二者相互作用机制，提供治疗靶点。

　　自噬（Autophagy）和 Warburg 效应是胰腺导管腺癌（Pancreatic Ductal Adenocarcinoma，PDAC）中两种常见的通路。迄今为止，这两种通路的相互作用尚未阐明。因此，本研究旨在体外探究这些因素之间的关系，有望为未来提供治疗靶点。在正常条件下培养 Mia-Paca-2 和 AsPc-1 细胞系。通过 Hank 平衡盐溶液（Hank’s balanced salt solution，HBSS）诱导饥饿以实现自噬，而 3 - 甲基腺嘌呤（3-methyladenine，3-MA）则用于抑制自噬。乳酸可模拟 Warburg 效应，而乳酸脱氢酶的主要抑制剂草氨酸盐（oxamate）能够抑制 Warburg 效应。采用 MTT 检测法测定细胞活力，通过蛋白质免疫印迹法（western blotting）检测自噬相关蛋白 Beclin-1 的表达水平，同时使用乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase，LDH）检测试剂盒测定乳酸含量。将细胞分别与不同浓度的 3-MA、乳酸和草氨酸盐进行孵育。结果显示，AsPc-1 细胞的活力下降，3-MA、乳酸和草氨酸盐的半数抑制浓度（IC₅₀）分别为 1195 μM、23.06 mM 和 8.617 mM。类似地，Mia-Paca-2 细胞中，3-MA、乳酸和草氨酸盐的 IC₅₀值分别为 873.9 μM、35.9 mM 和 26.74 mM 。研究数据表明，饥饿会增加自噬相关蛋白 Beclin-1 的表达（P 值＜0.05）；然而，3-MA 显著降低其表达（P 值＜0.05）。此外，单独使用乳酸对 Beclin-1 的表达水平没有影响（P 值＞0.05），但草氨酸盐处理会增加其表达（P 值＜0.05）。研究还发现，饥饿会降低乳酸水平，而自噬抑制剂 3MA 则显著增加乳酸生成（P 值＜0.05）。研究结果表明，单独的乳酸对自噬没有显著影响，草氨酸盐可能由于热量限制诱导自噬。另一方面，自噬抑制乳酸生成，而抑制自噬会导致乳酸生成增加。