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为应对 JN.1 变异株挑战，研究人员开发 JN.1 - mRNA 疫苗，其诱导强免疫应答，有重要防疫意义。
在新冠疫情的漫长历程中，SARS-CoV-2 病毒持续变异，给全球公共卫生带来了巨大挑战。自疫情爆发以来，Delta、Omicron 等多种变异株不断涌现，这些变异株不仅传播力增强，还具备更强的免疫逃逸能力，使得疫苗接种工作面临重重困难。即便在宣布新冠疫情结束后，病毒的威胁依旧存在。2023 年末出现的 JN.1 变异株，迅速在欧美引发感染高峰，其携带的 L455S 突变，让它比其他流行毒株更具传染性和免疫逃逸能力，现有以 XBB.1.5 为基础的疫苗对其防护效果大打折扣。在这样的严峻形势下，开发针对 JN.1 变异株的有效疫苗迫在眉睫。
四川大学的研究人员开展了一项极具意义的研究，他们致力于开发一种新型 mRNA 疫苗，并评估其对多种 Omicron 变异株的免疫保护效果。该研究成果发表在《Molecular Biomedicine》上。
研究人员运用了多种关键技术方法。在动物实验方面，选用健康雌性 BALB/c 小鼠作为实验对象，通过不同的免疫接种方案，观察小鼠的免疫反应。在检测免疫反应时，运用了酶联免疫吸附试验（ELISA）检测 JN.1 特异性 IgG 滴度，使用 ELISpot 技术检测干扰素 -γ（IFN-γ）分泌淋巴细胞和 IgG?抗体分泌细胞，借助假病毒中和试验评估中和抗体水平，利用流式细胞术分析各类免疫细胞。
下面来详细看看研究结果。
- JN.1 - mRNA 疫苗的制备与特性：研究人员精心设计了包含 5' 非翻译区（UTR）、开放阅读框（ORF）、3'UTR 和聚（A）尾的 JN.1 - mRNA 疫苗构建体。ORF 编码 JN.1 变异株的全长刺突蛋白，并引入了预融合稳定突变（2P）和弗林蛋白酶切割位点突变（GSAS）。通过微流控装置将刺突 mRNA 与 ALC0315 混合，制备出 mRNA - 脂质纳米颗粒（LNP）制剂。经检测，该疫苗呈球形，粒径均一，平均粒径为 85.02±0.7nm，ζ 电位为 - 7.34±1.48mV，在 4℃储存 42 天粒径仍稳定在约 85nm。通过向小鼠注射荧光素酶（Luc） - mRNA，发现疫苗主要在注射部位表达，肝脏中表达较少。
- JN.1 - mRNA 疫苗引发的强烈免疫反应：研究人员给 6 - 8 周龄的 BALB/c 小鼠接种三剂 JN.1 - mRNA 疫苗（每剂 10μg），并设置了 PBS 和 Luc - mRNA 对照组。结果显示，单剂疫苗就能有效诱导产生 RBD 特异性 IgG。三剂接种方案诱导出的中和抗体对 XBB.1.5、XBB.1.16.6、EG.5.1、BA.2.86、JN.1、JN.1.1、KP.2、KP.3 和 XDV.1 假病毒均有较高滴度。ELISpot 分析证实，接种三剂疫苗后，骨髓和脾脏中的 RBD 特异性 B 细胞被激活。同时，淋巴结和脾脏中的生发中心（GC）反应增强，T 滤泡辅助细胞（Tfh）增多。此外，该疫苗还能诱导强大的 Th1 型细胞免疫反应，促使大量 CD4?和 CD8? T 细胞产生 Th1 相关细胞因子，如 IFN - γ、肿瘤坏死因子 - α（TNF - α）和白细胞介素 - 2（IL - 2）。
- JN.1 mRNA 疫苗提供长期免疫保护：在小鼠接种第三剂疫苗 6 个月后采集样本进行检测。尽管 RBD 特异性 IgG 滴度和中和抗体水平有所下降，但仍保持一定水平，对 BA.2.86、JN.1 等多种假病毒的中和几何平均滴度（GMTs）依旧较高。此时，在脾脏和骨髓中仍能检测到 JN.1 特异性 B 细胞，淋巴结和脾脏中存在 RBDJN.1特异性记忆 B 细胞和浆细胞，且淋巴结、脾脏和骨髓中的长寿浆细胞（LLPCs）数量增加，脾脏中还能检测到分泌 IFN - γ 的细胞，这些都表明疫苗能提供长期的免疫保护。
- 异源初免 - 加强接种诱导更强的体液免疫反应：为研究异源接种的效果，研究人员开发了三聚体 RBDJN.1 - HR 重组蛋白作为异源加强疫苗，并与同源接种方案进行对比。结果发现，在接种三剂 JN.1 - mRNA 疫苗后，再接种一剂 RBDJN.1 - HR 蛋白疫苗的异源接种组，产生的针对 BA.2.86 及其亚变体的中和抗体水平显著高于两个同源接种组。同时，异源接种组骨髓和脾脏中 RBD 特异性 IgG?抗体分泌 B 细胞数量更多，淋巴结和脾脏中的 GC B 细胞和 Tfh 细胞水平也更高。
- 异源初免 - 加强接种诱导更强的细胞免疫反应：细胞免疫在对抗病毒感染中发挥着关键作用。研究发现，异源接种显著增强了 Th1 型免疫反应，CD4?和 CD8? T 细胞产生的 IL - 2、TNF - α 和 IFN - γ 明显增多。ELISpot 分析显示，异源接种组脾脏中分泌 IFN - γ 的淋巴细胞数量显著增加，表明该接种方案能有效激活细胞免疫。
综合研究结论与讨论部分，这项研究意义重大。研究人员成功开发的 JN.1 - mRNA 疫苗，在小鼠实验中展现出强大的免疫原性，能诱导产生强烈且持久的体液免疫和细胞免疫反应，对多种 Omicron 变异株都有较好的中和效果。而异源接种策略，即先接种 JN.1 - mRNA 疫苗，再接种 RBDJN.1 - HR 蛋白疫苗，比同源接种能诱导更强的免疫反应。不过，该研究也存在一定局限性，如未直接评估免疫小鼠血清对真实 SARS-CoV-2 的中和抗体，也未进行病毒攻毒实验来评估疫苗的保护效力。考虑到人群中已有较高的疫苗接种或感染史，后续可进一步研究将 JN.1 - mRNA 疫苗作为加强针，为已接种其他新冠疫苗的人群增强免疫力，这有望为应对不断变异的 SARS-CoV-2 病毒提供更有效的策略，对全球公共卫生防疫工作具有重要的参考价值。
