埃塞俄比亚鸡群中副鸡禽杆菌的隔离、检测与分析:为疫病防控提供关键依据

【字体: 时间:2025年03月16日 来源:BMC Microbiology 4

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  为确认鸡传染性鼻炎病原体,研究人员对埃塞俄比亚鸡群的副鸡禽杆菌(Av. paragallinarum )进行研究,证实其存在及菌株差异,意义重大。

  鸡传染性鼻炎是一种让养鸡人头疼不已的疾病,它就像一个隐藏在鸡群中的 “健康杀手”,专门盯上鸡的上呼吸道和鼻窦。感染后的鸡会出现眼睛和鼻子分泌物增多、打喷嚏、面部肿胀等症状,这不仅严重影响鸡的生长发育,还会导致产蛋量大幅下降,给家禽养殖业带来巨大的经济损失。而副鸡禽杆菌(Avibacterium paragallinarum,Av. paragallinarum )正是引发这种疾病的 “罪魁祸首”。
在埃塞俄比亚,以往对鸡传染性鼻炎病原体的研究主要依赖临床评估和细菌学技术,虽然成功从后院鸡中分离出副鸡禽杆菌,但一直缺乏分子层面的确证。为了更深入了解鸡传染性鼻炎的病原体,来自埃塞俄比亚国家兽医研究所、贡德尔大学兽医学院和动物科学系以及联合国粮食及农业组织紧急跨界动物疾病中心(ECTAD)的研究人员开展了一项重要研究。该研究成果发表在《BMC Microbiology》杂志上。

研究人员采用了多种关键技术方法。在样本采集方面,他们从埃塞俄比亚六个地区的商业养鸡场,收集了 74 份来自出现传染性鼻炎症状鸡的鼻腔和眶下窦拭子样本。在细菌分离与鉴定上,先通过常规 PCR 筛选样本,再将 PCR 阳性样本接种在巧克力琼脂和脑心浸液琼脂上进行细菌分离,并利用革兰氏染色观察细菌形态。生化鉴定则进行了一系列生化测试,如甲基红试验、Voges Proskauer 试验等。分子检测上,提取细菌基因组 DNA,运用 HPG2-PCR 技术进行检测,并对 PCR 产物进行测序和系统发育分析。

研究结果主要从以下几方面呈现:

  1. 临床和尸检:患病鸡表现出面部肿胀、眶下窦增大、结膜炎、眼鼻分泌物增多等典型症状,尸检发现眶下窦有渗出物,部分病例呈慢性纤维性双侧眶下窦炎,严重时导致鸡双眼闭合。
  2. 细菌分离和形态检测:在巧克力琼脂和脑心浸液琼脂上培养 24 小时后,观察到副鸡禽杆菌形成小而半透明、类似露珠的菌落。革兰氏染色显示,该菌为革兰氏阴性、短杆状或球杆菌。
  3. 生化鉴定:副鸡禽杆菌对过氧化氢酶、氧化酶、脲酶、吲哚、甲基红和 Voges Proskauer 试验呈阴性反应,但对葡萄糖、蔗糖和麦芽糖具有发酵能力。
  4. 分子检测:74 份临床样本中,28 份(38%)通过 HPG-2 PCR 检测为副鸡禽杆菌阳性。对 10 份培养样本进行 HPG-2 PCR 验证,8 份呈阳性,电泳显示阳性样本有 511bp 的 DNA 条带。
  5. DNA 测序和系统发育树分析:对 11 份埃塞俄比亚分离株的 HPG-2 基因进行测序,发现不同地区分离株的核苷酸和氨基酸序列存在差异。系统发育树分析表明,这些分离株可分为两组,且与来自伊朗、中国、孟加拉国、埃及等国家的菌株存在遗传相关性。

研究结论显示,该研究首次通过 PCR 和 HPG-2 基因测序在埃塞俄比亚证实了副鸡禽杆菌的存在,且发现至少存在两种不同血清型。埃塞俄比亚北部和东部地区的分离株与伊朗、中国和孟加拉国的菌株遗传相似性较高,而中部地区的分离株与埃及的菌株关系密切。这些发现为鸡传染性鼻炎的流行病学研究提供了重要线索,暗示了潜在的跨区域传播途径。

在讨论部分,研究人员指出,鸡传染性鼻炎对家禽业经济影响巨大,准确鉴定病原体至关重要。传统细菌学技术存在局限性,而 PCR 技术是可靠的诊断方法。此次研究不仅为埃塞俄比亚鸡传染性鼻炎的防控提供了科学依据,也强调了持续监测副鸡禽杆菌的重要性。后续进一步对当地流行菌株进行分子特征分析,有助于开发针对性的疫苗,更好地防控鸡传染性鼻炎,促进埃塞俄比亚家禽养殖业的健康发展。
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