小麦 TaFDL 基因家族全基因组鉴定及响应春化的表达分析:解锁春化分子机制的新钥匙

【字体: 时间:2025年03月17日 来源:BMC Genomics 3.5

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  为探究小麦春化机制,研究人员对 TaFDL 基因家族展开研究,鉴定出 62 个成员,明确其功能,为相关研究提供依据。

  在广袤的麦田里,小麦的生长周期与开花时间紧密相连,而春化过程对小麦开花起着至关重要的作用。所谓春化,就是像冬小麦这类植物,必须经历一段长时间的低温期才能启动开花进程。这一过程直接影响着作物的产量和品质,然而,其背后复杂的分子机制却尚未完全明晰。
FLOWERING LOCUS D(FD)作为一种基本亮氨酸拉链(bZIP)转录因子,在植物的春化、开花以及应激反应中扮演着关键角色。在小麦中,TaFD-like(TaFDL)基因是拟南芥 FD 的功能同源基因,但目前针对小麦 TaFDL 基因家族的研究却十分匮乏。为了填补这一空白,中国科学院合肥物质科学研究院的研究人员挺身而出,开展了一项深入的研究。他们的研究成果发表在《BMC Genomics》上,为我们理解小麦春化的分子机制带来了新的曙光。

研究人员主要运用了生物信息学分析、转录组数据分析、克隆技术、亚细胞定位分析以及 qRT-PCR 等关键技术方法。他们从多种数据库中获取数据,通过生物信息学工具对 TaFDL 基因家族成员进行筛选、鉴定和分析;利用转录组数据分析基因在不同条件下的表达模式;克隆关键基因并进行功能验证;借助亚细胞定位分析明确蛋白的定位;运用 qRT-PCR 技术测定基因在不同处理下的表达量变化。

研究结果如下:

  1. TaFDL 基因家族全基因组鉴定:研究人员成功鉴定出 62 个 TaFDL 基因家族成员,并依据染色体位置进行命名。这些成员编码的蛋白质长度在 129 - 396 个氨基酸之间,相对分子质量平均为 30594.33 Da,等电点介于 5.22 - 10.2 之间,均为亲水性不稳定蛋白。
  2. 进化关系分析:通过构建系统发育树,TaFDL 家族被划分为 4 个亚家族。不同亚家族成员与不同物种的 FD 同源基因聚类在一起,且聚类关系与物种的整体基因组进化和分化时间相契合。
  3. 基因结构与保守基序分析:各亚家族成员在保守基序、内含子 / 外显子结构、保守结构域以及蛋白质结构方面呈现出保守性。例如,TaFDLA 亚家族包含 10 个保守基序,其中 motif 7 和 motif 5 为该亚家族特有;TaFDLB 亚家族成员均含有 motif 2 等。
  4. 染色体定位与基因复制分析:TaFDL 基因广泛分布在小麦的 21 条染色体上,基因复制分析表明,串联重复和片段重复均对 TaFDL 基因家族的进化产生影响,其中片段重复是基因家族扩张的主要驱动力。并且,TaFDL 基因家族在进化过程中受到纯化选择(negative selection)。
  5. 顺式作用元件与 GO 分析:启动子区域的顺式作用元件分析显示,TaFDL 基因包含大量与光、植物激素、低温、防御和应激以及植物生长发育相关的元件。GO 分析发现,TaFDL 基因家族的功能与繁殖、激素反应、光反应、开花和温度反应等生物过程相关。
  6. 表达模式分析与关键基因克隆:转录组数据分析揭示了 TaFDL 基因在不同发育阶段和组织中的表达模式,部分基因在分蘖期到开花期表达量较高,还有 30 个基因在所有生长阶段和组织中均有表达。研究人员进一步克隆了 5 个关键基因(TaFDL - 2A - 8、TaFDL - 2A - 11、TaFDL - 5A - 44、TaFDL - 5D - 51 和 TaFDL - 6D - 56)进行深入研究。
  7. 亚细胞定位与转录激活分析:亚细胞定位实验表明,TaFDL - 2A - 8 定位于细胞核,而 TaFDL - 2A - 11、TaFDL - 5A - 44、TaFDL - 5D - 51 和 TaFDL - 6D - 56 则在细胞核和细胞膜中均有定位。转录激活实验显示,TaFDL - 2A - 8、TaFDL - 2A - 11 和 TaFDL - 6D - 56 具有转录自激活能力,而 TaFDL - 5A - 44 和 TaFDL - 5D - 51 则不具备。
  8. 不同春化条件下的 qRT-PCR 分析:研究人员设置了 4 种不同的环境条件(T1、T2、T3、T4),探究温度、光周期和激素添加对 5 个关键 TaFDL 基因表达的影响。结果显示,不同基因在不同处理下的表达模式存在差异,表明它们对低温和光照强度的响应各不相同。
  9. 遗传多样性分析:对 9 个小麦品种中 5 个关键 TaFDL 基因及其同源基因的序列分析发现,这些基因存在显著的遗传多样性,包括碱基替换、插入和缺失等变异。

研究结论和讨论部分指出,本研究全面鉴定了小麦 TaFDL 基因家族,明确了其进化关系、结构特征和潜在功能。TaFDL 基因家族在春化、开花、激素响应和应激反应等过程中发挥着重要作用,不同亚家族成员可能具有不同的功能。基因复制事件促使了 TaFDL 基因家族的扩张,并且在进化过程中受到纯化选择的作用,使得大多数成员得以保守。转录组数据和 qRT-PCR 结果相互印证,表明 TaFDL 基因对光、温度、激素和应激均有不同程度的响应。此外,5 个关键 TaFDL 基因及其同源基因在不同小麦品种中的遗传多样性,为小麦育种提供了潜在的靶点,有助于培育出更适应环境变化、产量更高的小麦品种。然而,目前对关键基因的功能验证还不够完善,未来的研究需要进一步聚焦于 TaFDL 基因家族在春化早期阶段的作用机制,以及它们对光和环境温度响应的具体机制,从而更深入地理解小麦春化的分子机制,为农业生产提供更坚实的理论基础。
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