非洲猪瘟病毒细胞适应性研究：解锁病毒基因功能，助力疫苗研发

为解决非洲猪瘟病毒（ASFV）研究及疫苗开发难题，研究人员开展 ASFV 适应 Vero 细胞研究，获 3 个克隆，为探索基因功能提供模型。

　　非洲猪瘟（African swine fever，ASF）是一种由非洲猪瘟病毒（African swine fever virus，ASFV）引起的、极具传染性的病毒性疾病，会感染家猪和野猪。ASFV 具有高度受限的细胞嗜性，主要以猪巨噬细胞为靶细胞进行高效且稳定的复制。这种对特定细胞类型的严格要求给 ASFV 的研究带来了巨大挑战，也是疫苗研发的关键阻碍。尽管有报道称多种细胞系支持 ASFV 复制，但在细胞系传代过程中，病毒会发生难以预测的显著基因变化。在这项研究中，研究人员将一株高致病性的韩国 ASFV 分离株适应 Vero 细胞，并在细胞适应早期采用空斑纯化技术，消除病毒亚群之间的竞争压力。最终获得了 3 个具有不同遗传特性的病毒克隆，并分别独立传代 30 次。这 3 个克隆即使在传代 30 次后，仍能在猪肺泡巨噬细胞（porcine alveolar macrophages，PAMs）和 Vero 细胞中高效复制，而亲本病毒却无法在 Vero 细胞中生长。基因分析显示，适应细胞的病毒克隆具有多个单核苷酸多态性（single-nucleotide polymorphisms，SNPs），同时其基因组中还存在独特的 SNPs 和大片段缺失。这些克隆中的突变多样性为探索基因功能及其对表型特性的影响提供了宝贵模型。未来研究将聚焦于评估这些 SNPs 在体内的表型效应，为疫苗开发提供支持。