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在 COVID-19 大流行背景下，为检测人血浆中抗 SARS-CoV-2 抗体，研究人员开展了基于流式细胞术同时检测人血浆中抗 SARS-CoV-2 IgG 和 IgM 的研究。结果显示该方法可靠准确，有助于评估免疫、识别无症状感染者等。
新冠疫情自 2019 年底爆发以来，迅速在全球范围内蔓延，给人类的生命健康和社会经济带来了巨大的冲击。严重急性呼吸综合征冠状病毒 2（SARS-CoV-2）是引发这场全球性公共卫生危机的 “罪魁祸首” 。在这场抗疫战斗中，了解人体对 SARS-CoV-2 的免疫反应变得至关重要。然而，现有的检测手段存在诸多不足。实时荧光定量聚合酶链式反应（PCR）虽为诊断 SARS-CoV-2 感染的 “金标准”，但它只能检测病毒 RNA，且在感染后期可能出现假阴性结果 。而其他检测抗 SARS-CoV-2 抗体的技术，如酶联免疫吸附试验（ELISA）和侧向流动免疫分析，在特异性和敏感性方面存在局限，基于细胞的流式细胞术难以高通量检测，基于微球的多重流式细胞术成本又过高。
为了突破这些困境，美国食品药品监督管理局（FDA）国家毒理学研究中心生化毒理学部门的研究人员 Jia-Long Fang、Leeza Shrestha 和 Frederick A. Beland 开展了一项重要研究，相关成果发表在《Scientific Reports》上。
研究人员运用了多种关键技术方法。首先，他们获取了 100 名健康献血者（样本采集于 COVID-19 大流行前）和 100 名经实时 PCR 确诊的 COVID-19 患者的血浆样本。接着，通过基因工程技术，将 SARS-CoV-2 武汉株结构蛋白的编码序列插入 pcDNA3.4 哺乳动物表达载体，转染 FreeStyle 293F 细胞，从而制备出重组 SARS-CoV-2 结构蛋白，包括刺突蛋白亚基 1（S1）、S1 的 N 端结构域（S1A）、刺突受体结合域（RBD）、刺突蛋白亚基 2（S2）和核衣壳蛋白（N）。随后，运用基于微球的流式细胞术，同时检测人血浆样本中的抗 SARS-CoV-2 IgG 和 IgM 抗体 。
在研究结果部分：
- 流式细胞术检测方法的开发：通过蛋白质免疫印迹（Western blot）证实了重组蛋白的正确性，成功制备了病毒蛋白偶联的靶标微球和 5% 牛血清白蛋白（BSA）偶联的对照微球，开发出了能同时检测人血浆中抗 SARS-CoV-2 IgG 和 IgM 的流式细胞术检测方法，并确定了检测阳性的临界值。
- 人血浆中抗 SARS-CoV-2 抗体的检测情况：在健康献血者组中，仅个别样本对少数靶抗原呈弱阳性反应；COVID-19 患者组中，IgG 对各 SARS-CoV-2 抗原的反应性比 IgM 更强。以流行率来看，抗 RBD IgG = 抗 N IgG > 抗 S1 IgG > 抗 S1A IgG > 抗 S2 IgG ，抗 RBD IgM > 抗 S1 IgM > 抗 N IgM > 抗 S2 IgM。
- COVID-19 患者中抗体与各因素的相关性：男性 COVID-19 患者的抗 S2 IgG 流行率和抗 RBD IgM 水平高于女性；年龄与抗 S1 IgG、抗 S1A IgG、抗 RBD IgG 和抗 N IgG 水平呈正相关，65 岁及以上患者的抗 RBD IgG 水平显著高于 29 岁及以下患者；不同种族（白种人和西班牙裔）间抗体流行率和水平差异不显著；症状出现后天数与抗体流行率和水平无显著关联；重症患者的抗 S1 IgG、抗 S1A IgG 和抗 RBD IgG 水平显著高于轻症或中症患者。
研究结论和讨论部分表明，该研究开发的流式细胞术检测方法，尤其是以 RBD 为抗原时，具有高灵敏度和特异性，能同时检测人血浆中的抗 SARS-CoV-2 IgG 和 IgM 抗体。不过，该方法也存在局限性，如使用的是原始 SARS-CoV-2 武汉株的抗原，可能无法灵敏检测出针对当前变异株的抗体 。但总体而言，这项研究为评估人体免疫、识别无症状感染者、确定 COVID-19 流行率提供了一种有效的分析方法，在疫情防控和临床诊断中具有重要意义。
