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为探究埃氏希瓦氏菌(E. marmotae)在人体中的存在情况,研究人员从健康人粪便样本中分离出该菌。研究发现其 4.91 Mb 的环状基因组及 3 种质粒,这为深入了解该菌的特性和潜在影响提供了依据。
埃氏希瓦氏菌(Escherichia marmotae)已在动物和环境中被发现。此次,研究人员从一份健康人的粪便样本中分离出了该菌。其基因组为 4.91 Mb 的环状结构,GC 含量为 50.34%,并且与三种质粒相关:pF12YCO47 - 2(89.9 kb,GC 含量 50.2%)、pF12YCO47 - 3(47.9 kb,GC 含量 44.3%)和 pF12YCO47 - 1(95.4 kb,GC 含量 47.2%)。
埃氏希瓦氏菌是肠杆菌科(Enterobacteriaceae)中的一种革兰氏阴性菌,最初是从喜马拉雅旱獭(Marmota himalayana)的粪便中分离出来的。起初它被归类为埃希氏菌属(Escherichia)的隐秘进化枝 V,曾被认为在人类中存在较少。但自重新分类后,它在野生动物和环境中均有发现,还被认为可能是引起人类侵袭性感染的病原体。
F12YCO47 是在一项肥胖粪便微生物群移植(FMT)研究中,从一名 26 岁健康女性的粪便样本中分离得到的。研究人员先将粪便样本进行系列稀释(1:10),在酵母酪蛋白胨脂肪酸琼脂(YCFA)上需氧培养,37°C 培养 24 小时后挑取 F12YCO47 菌落,在 YCFA 平板上多次传代培养以获得纯菌落,随后通过基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI - TOF MS)确认其为埃氏希瓦氏菌,匹配度高达 2.61。
在基因组测序环节,研究人员先将 F12YCO47 在羊血琼脂上复苏,挑取一个菌落在胰蛋白胨大豆肉汤中培养,提取 DNA 并构建 DNA 文库,使用牛津纳米孔技术(ONT)的 PromethION 2 Solo 设备和 R10.4 流动池进行测序。之后运用多种软件对基因组进行组装、抛光和注释。
基因组质量评估显示,其完整性达 100%,污染率仅 0.08%。研究还发现了三种质粒,经比对分别与不同菌的质粒相似。全基因组比较将 F12YCO47 归为埃氏希瓦氏菌,且它被分类到进化枝 V。此外,研究人员还对基因组中的基因进行了分析,发现了编码多药外排泵蛋白的 MdfA 基因,未发现志贺毒素基因和抗菌耐药相关的点突变。
该研究由 Rockfield Trust 的慈善捐赠资助,参与研究的还有 Gut Bugs Study Group 的众多成员。