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为解决现有类风湿关节炎（RA）治疗药物副作用大、抗炎能力有限的问题，研究人员开展了以叶酸修饰层状双氢氧化物（FA-LDH）为对象，靶向 M1 巨噬细胞调节其极化的研究。结果显示 FA-LDH 可缓解炎症、保护关节，为 RA 治疗提供新策略。
类风湿关节炎（Rheumatoid Arthritis，RA）是一种令人痛苦的慢性自身免疫疾病，它就像一个隐藏在身体里的 “破坏者”，悄无声息地攻击着人们的关节。免疫系统的紊乱使得患者的关节出现进行性炎症和持续性滑膜炎，不仅会导致骨头和软骨受损，严重时甚至会让患者失去行动能力，极大地影响了生活质量。
目前治疗 RA 的药物种类不少，传统的合成改善病情抗风湿药、非甾体抗炎药以及糖皮质激素，虽然能在一定程度上缓解症状、减缓病情发展，但常常需要大剂量、频繁服用，这就带来了许多副作用。而生物制剂虽然在抑制细胞因子水平、预防关节破坏方面有一定效果，可高昂的费用以及严重的风险，比如可能导致结核病复发、严重感染等，让很多患者望而却步。所以，开发更高效、安全的抗风湿药物迫在眉睫。
为了攻克这一难题，山东第一医科大学附属山东省立医院的研究人员进行了深入研究。他们将目光聚焦在层状双氢氧化物（Layered Double Hydroxides，LDH）上，这种无机材料具有生物相容性、可降解性和 pH 敏感性等优点。研究人员对其进行叶酸（Folic Acid，FA）修饰，得到 FA-LDH，试图用它来治疗 RA，并探究其在免疫调节方面的作用。研究成果发表在《BIOMATERIALS RESEARCH》上，为 RA 的治疗带来了新的曙光。
研究人员采用了多种关键技术方法。在材料制备上，通过水热法合成 LDH，并进一步制备 FA-LDH；利用多种表征技术，如 X 射线衍射（XRD）、透射电子显微镜（TEM）等对材料的结构、形貌和理化性质进行分析；运用细胞实验，包括细胞毒性实验、免疫荧光染色实验等，研究 FA-LDH 对细胞的影响；借助动物实验，建立胶原诱导性关节炎（Collagen-induced Arthritis，CIA）小鼠模型，评估 FA-LDH 的治疗效果和安全性。
研究结果如下：
- 材料表征：XRD 结果表明 LDH 具有良好的晶格结构，DLS 测量显示其平均流体动力学直径为 69.7±3.3nm，FA 修饰后增大到 102.1±3.7nm，zeta 电位降低。TEM 显示 LDH 和 FA-LDH 均呈不规则六边形片状结构，且 LDH 在酸性环境中降解更快，能释放 OH?中和酸性微环境。
- 体外生物相容性：CCK-8 实验表明，10 - 160μg/ml 的 LDH 在 24h 或 72h 内对 RAW 264.7 细胞无明显细胞毒性，而 FA-LDH 在较高浓度时细胞毒性稍大，综合考虑选择 40μg/ml 用于后续实验。
- 细胞摄取行为：由于 M1 巨噬细胞表面叶酸受体（FRs）表达升高，FA 修饰的 LDH 能通过 FA 与 FRs 的相互作用更有效地被 M1 巨噬细胞摄取，实验中 FA-LDH 组细胞质荧光强度比 LDH 组增加约 30%。
- 巨噬细胞表型转变：通过 qRT-PCR、Western blot 和免疫荧光染色等实验发现，LDH 和 FA-LDH 都能诱导 M1 巨噬细胞向 M2 表型转变，FA-LDH 效果更显著。例如，FA-LDH 处理后，M1 巨噬细胞相关的 IL-1β 和 TNF-α 的 mRNA 表达水平分别降至 LPS 组的 52% 和 24%，而 M2 巨噬细胞相关的 IL-10 和 TGF-β 的表达增加。
- 免疫调节机制：RNA 测序（RNA-seq）分析表明，LDH 处理后巨噬细胞的基因表达发生显著变化，M1 巨噬细胞相关基因下调，M2 巨噬细胞相关基因上调，KEGG 通路分析显示 NF-κB 信号通路等被下调。进一步研究发现，LDH 通过调节免疫微环境的 pH 影响 Smad5 的核质转运，抑制 pSmad5 和 p65 的核转位，进而抑制 NF-κB 信号通路的激活，减少炎症反应。
- 体内靶向分布和治疗效果：在 CIA 小鼠模型中，注射 Cy5 标记的 FA-LDH 后，通过体内成像系统（IVIS）观察到其能有效在炎症关节部位积累。对 CIA 小鼠进行治疗实验发现，FA-LDH 能显著减轻肢体肿胀，降低关节炎评分和 paw 厚度，改善骨侵蚀，保护关节软骨和骨结构。组织学染色结果也显示，FA-LDH 组关节炎症和软骨损伤明显减轻，同时促进 M2 巨噬细胞极化，抑制 M1 巨噬细胞极化。
- 体内安全性：实验期间，LDH 和 FA-LDH 处理组小鼠无明显临床不适，体重无显著变化。主要器官组织学检查和血液生化指标检测显示，与健康组相比无明显差异，表明 LDH 和 FA-LDH 具有良好的体内安全性。
研究结论和讨论部分指出，RA 的发病机制复杂，现有治疗手段存在诸多不足。本研究中，LDH 展现出了独特的优势，它能调节巨噬细胞极化，重塑免疫微环境，抑制炎症反应，且安全性良好。FA 修饰进一步增强了 LDH 对 M1 巨噬细胞的靶向性，提高了治疗效果。这一研究为 RA 的治疗提供了一种全新的策略，FA-LDH 有望成为一种有效的无药物治疗 RA 的候选材料，为众多 RA 患者带来新的希望，推动了类风湿关节炎治疗领域的发展。
