优化电穿孔技术助力高效评估糙皮侧耳(Dichomitus squalens)遗传元件的研究意义重大
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时间:2025年03月30日
来源:World Journal of Microbiology and Biotechnology 4
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为解决糙皮侧耳(D. squalens)遗传操作方法复杂耗时的问题,研究人员开展了电穿孔转化系统的研究。通过优化参数,获得每 μg DNA 有 77±11 个转化子的结果。该研究拓展了遗传工程工具,为生物技术应用奠基。
糙皮侧耳(Dichomitus squalens)是一种极具潜力的用于工业酶生产的白腐担子菌,要充分发挥其生物技术潜力,就需要高效的遗传操作体系。虽然原生质体介导和根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导的转化等已有方法在糙皮侧耳中有效,但它们既复杂又耗时。本研究引入了针对糙皮侧耳的电穿孔转化系统,该系统更简单、更节省时间。通过优化电穿孔参数,每微克 DNA 可获得 77±11 个转化子。此外,利用优化后的电穿孔方案,验证了诺尔丝菌素 N - 乙酰转移酶基因作为筛选标记、纳米荧光素酶(NanoLuciferase)基因作为生物发光报告基因在糙皮侧耳中的适用性。本研究拓展了糙皮侧耳遗传工程的工具库,为未来的分子研究提供了更大的灵活性。电穿孔系统的开发不仅提高了糙皮侧耳遗传操作的便捷性,还为进一步探索其酶学能力以及在生物技术中的潜在应用奠定了基础。简化后的实验方案能够实现更高效、快速的遗传工程操作,有助于基因功能的研究以及用于工业目的的改良菌株的开发。
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