RNA N6-甲基腺苷去甲基化酶FTO通过m6A-YTHDF2依赖性方式调控TRIB3介导的自噬促进糖尿病伤口愈合

糖尿病伤口愈合难题亟待突破！南京大学医学院附属鼓楼医院团队发现FTO通过m6A修饰调控TRIB3-SQSTM1自噬通路的新机制。研究揭示高血糖环境下表皮角质形成细胞中FTO表达下调导致m6A修饰异常，通过YTHDF2依赖性途径加速TRIB3 mRNA降解，最终抑制自噬并延缓伤口愈合。该研究为开发靶向m6A表观遗传治疗的糖尿病足溃疡治疗方案提供了新靶点。

　　糖尿病引发的慢性伤口愈合障碍是临床重大挑战，全球约25%的糖尿病患者会发展为糖尿病足溃疡，其中30%最终需要截肢。表皮变薄、角质形成细胞功能障碍是高血糖环境下伤口难以愈合的关键因素，但其分子机制尚未阐明。南京大学医学院附属鼓楼医院烧伤整形外科团队在《Cell Death and Disease》发表的研究，揭示了RNA表观遗传修饰在糖尿病伤口愈合中的核心作用。

研究团队采用多组学技术结合体内外模型展开系统研究。通过GEO数据库挖掘和临床样本验证发现糖尿病表皮中FTO（fat mass and obesity-associated protein）表达显著下调，m⁶A修饰水平升高。利用CRISPR-Cas9基因编辑构建FTO敲除的HaCaT和NHEK细胞系，结合STZ诱导和db/db两种糖尿病小鼠模型，采用m⁶A甲基化RNA免疫共沉淀测序（MeRIP-qPCR）、双荧光报告基因、透射电镜观察自噬小体等技术，系统解析了FTO-TRIB3-SQSTM1信号轴的作用机制。

"FTO在糖尿病表皮中的表达特征"部分显示，糖尿病患者的表皮厚度较正常人减少40%，且FTO在I型和II型糖尿病小鼠模型中均显著下调。免疫荧光和Western blot证实高糖培养的角质形成细胞中FTO蛋白水平下降50%，伴随m⁶A全局修饰水平升高1.8倍。

"FTO沉默抑制角质形成细胞功能"实验证明，FTO敲除使细胞增殖率降低60%，凋亡率增加3倍，划痕实验显示迁移能力下降55%。在STZ诱导的糖尿病小鼠模型中，FTO抑制剂FB23-2处理使伤口愈合延迟4天，创面闭合率仅为对照组的40%。

"高糖通过FTO下调诱导自噬障碍"部分发现，FTO敲除导致LC3II/LC3I比值下降65%，SQSTM1积累减少70%。mRFP-GFP-LC3示踪显示高糖处理使自噬溶酶体数量减少80%，透射电镜观察到自噬小体数量显著减少。

"TRIB3作为FTO功能靶点的鉴定"是研究的核心发现。RNA-seq筛选出TRIB3（tribbles pseudokinase 3）是FTO调控的关键下游基因。MeRIP-qPCR证实FTO通过TRIB3 mRNA 3'UTR区特定位点（MUT2）的m⁶A去甲基化维持其稳定性，而YTHDF2识别m⁶A修饰并促进TRIB3降解。当YTHDF2被敲除时，TRIB3 mRNA半衰期延长2.3倍。

"FTO通过TRIB3-SQSTM1相互作用调控自噬"机制阐明部分显示，TRIB3过表达可挽救FTO敲除导致的自噬缺陷，使LC3II水平恢复至对照组的85%。免疫共沉淀证实TRIB3与SQSTM1直接结合，这种相互作用在高糖环境下减弱50%，导致自噬流受阻。

这项研究首次揭示了m⁶A去甲基化酶FTO在糖尿病伤口愈合中的关键作用，阐明了FTO-YTHDF2-TRIB3-SQSTM1这条全新的表观遗传-自噬调控轴。临床意义在于：①FTO表达水平可作为糖尿病伤口愈合能力的生物标志物；②靶向FTO的小分子激动剂或TRIB3稳定剂有望成为糖尿病足溃疡的治疗新策略；③为开发基于m⁶A修饰调控的表观遗传疗法提供了理论依据。研究团队指出，下一步将探索负载FTO过表达载体的水凝胶敷料在糖尿病伤口中的应用效果。