使用NanoDrop Ultra进行高效、可靠的超微量核酸检测分析

在生命科学实验室中，核酸的纯度和浓度检测是实验成功的关键步骤之一。无论是DNA还是RNA的提取，精准的定量分析都至关重要。今天，我们要为大家展示NanoDrop Ultra在核酸检测实验中的出色表现。您将可以高效、精准、可靠地用于组织、唾液、植物或其他来源提取的DNA或RNA样本的浓度、纯度以及污染物分析。NanoDrop Ultra使用五个光程自动匹配技术，可以在1-27500ng/μL浓度范围内无需稀释，实现高准确度的浓度检测。

使用 Tris-EDTA 缓冲液 (TE pH 7.5)稀释小牛胸腺 DNA 溶液 (Invitrogen, 15633019)，浓度范围从5.0 ng/µL到10,000 ng/µL，共计八个样品。此外，还制备了绿色食用色素，它与dsDNA的光谱形状相似，以模拟约25,000 ng/µL的高浓度，并作为第九个样品。在NanoDrop™ OneC和NanoDrop Ultra机器上分别进行10次重复检测。

对1.0 ng/µL至50 ng/µL低浓度范围内的五个样品，使用 2.0 µL样品量进行五次重复测量以验证 NanoDrop Ultra 仪器上的可重复性。以Thermo Scientific™ Evolution™ One Plus分光光度计（基于比色皿的分光光度计）作为参考。应用朗伯比尔定律，使用在260 nm处测得的吸光度和双链DNA 因子50 ng-cm/µL计算两个样品的浓度。确定了平均浓度、标准偏差和变异系数(%CV)。将NanoDrop Ultra仪器上的测量结果与 NanoDrop One（前代产品）和 Evolution One Plus（传统分光光度计）上的测量结果进行了比较。

表1：NanoDrop Ultra的dsDNA、ssDNA 和 RNA 基座浓度检测范围。

表2：使用 NanoDrop One 分光光度计和 NanoDrop Ultra 分光光度计测量 dsDNA 的九种连续稀释液的平均浓度。每个样品取 10 次重复的平均值，并报告标准偏差 (ng/µL)和%CV。

表3：使用 NanoDrop Ultra 分光光度计测量的九个样品的每次重复测量浓度结果以 ng/µL 为单位显示。

表2和表3数据显示：对于低于100 ng/µL的样品，标准偏差为 ±1.0 ng/µL，所有样品均低于仪器性能指标限值，最高偏差为0.76 ng/µL。对于高于100 ng/µL的样品，仪器性能指标限值为2% CV，其中NanoDrop Ultra分光光度计的最高值为0.91%。

图1：NanoDrop One与 NanoDrop Ultra 分光光度计之间的线性比较。

图1显示了NanoDrop One计算出的浓度与NanoDrop Ultra计算出的浓度的线性曲线。回归线的R²为1.000，这表明两种仪器报告的浓度值高度一致。

表4：NanoDrop Ultra上较低检测范围的可重复性。平均浓度和标准偏差基于 NanoDrop Ultra仪器的五次重复和Evolution One Plus仪器的三次重复。显示了所测试的五个样品的平均浓度和标准偏差。样品测量结果表现出高重复性。

图2：Evolution One Plus 与 NanoDrop Ultra 分光光度计在低浓度范围内的线性比较。回归线 (R²=1.000) 证实了每种仪器报告的浓度值具有强相关性。

由此可见：在整个dsDNA 动态范围（1.0 ng/µL至27,500ng/µL）内，NanoDrop Ultra报告的样品浓度具有很高的可重复性和准确性。对于较低的检测范围（1.0 ng/µL至50 ng/µL），与传统分光光度计相比，NanoDrop Ultra亦表现出了出色的可重复性和准确性。对于测试的两个浓度范围，可重复性均在仪器的性能指标内。NanoDrop Ultra分光光度计报告的平均浓度也与传统分光光度计的平均浓度具有很好的相关性，两个浓度范围的R²均为1.000。

借助超微量基座表面和自动调整光程技术，仅使用1.0–2.0 µL的样品量即可对核酸样品进行定量和鉴定，而无需进行容易出错的稀释。NanoDrop Ultra仪器内置的预配置软件使紫外可见分光光度法成为任何生命科学实验室的简单快捷的技术。

写在最后

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