青田稻田鲤(Cyprinus carpio var. qingtianensis)首个细胞系的建立与缺氧应激机制解析:解锁鱼类低氧适应密码
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时间:2025年04月01日
来源:Aquaculture International 2.2
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为探究青田稻田鲤(PF-carp)在缺氧条件下的抗逆机制,研究人员建立了该物种首个鳍源细胞系 CQF。研究发现,随着缺氧时间延长,CQF 细胞出现多种异常,且细胞会通过上调抗氧化酶活性适应缺氧。过表达 HIF-1α 可减轻细胞凋亡,该细胞系为研究鱼类缺氧反应机制提供了重要模型。
为探究青田稻田鲤(Cyprinus carpio var. qingtianensis,PF-carp)在缺氧条件下的抗逆机制,研究人员建立了该物种首个鳍源细胞系,命名为青田稻田鲤鳍细胞(cells of Qingtian paddy field carp fin,CQF)。CQF 细胞主要为成纤维细胞,在添加 1% 抗生素和 15% 胎牛血清的 L-15 培养基中,于 27°C、5% CO2条件下培养。为研究细胞对缺氧的反应,将 CQF 细胞置于常氧和缺氧(6 小时、12 小时、24 小时)四种条件下处理。随着缺氧时间延长,细胞形态异常、氧化还原稳态被破坏,细胞凋亡加剧,表现为活性氧(ROS)水平升高、线粒体膜电位(ΔΨm)丧失和 caspase-3 上调。CQF 细胞通过上调抗氧化酶活性来适应缺氧环境。此外,以 pcDNA3.1 为载体构建缺氧诱导因子 1α(HIF-1α)过表达质粒,利用 eGFP-N3 进行荧光标记以实现亚细胞定位。常氧条件下,HIF-1α 分布于细胞质和细胞核;缺氧时,它会转移至细胞核调控适应性转录。在缺氧的 CQF 细胞中过表达 HIF-1α 可减少细胞凋亡,维持细胞完整性。因此,CQF 细胞系为研究 PF-carp 在缺氧时的自噬、细胞凋亡和基因表达提供了有价值的模型,有助于深入了解鱼类的缺氧反应机制。
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