铜绿假单胞菌血流感染中抗假单胞菌β-内酰胺类药物的耐药机制与敏感性研究

本研究揭示了铜绿假单胞菌血流分离株对β-内酰胺类药物的耐药特征，通过多变量分析证实AmpC β-内酰胺酶、OprD孔蛋白及外排泵表达水平与耐药表型显著相关，特别验证了新型药物头孢洛扎/他唑巴坦(C/T)和头孢地尔(FDC)对传统耐药菌株的稳定活性，为临床治疗决策提供了重要分子流行病学依据。

　　

ABSTRACT
铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)血流感染(BSI)的耐药性问题日益严峻。研究团队对97株不含碳青霉烯酶基因的临床分离株进行了全面分析，发现传统β-内酰胺类药物中哌拉西林/他唑巴坦(TZP)、头孢他啶(CAZ)和头孢吡肟(FEP)的敏感率维持在80%水平，而氨曲南(ATM)敏感率最低(71.1%)。值得注意的是，新型药物C/T和FDC展现出卓越活性，敏感率均达99%，仅各1株呈现中介耐药。

INTRODUCTION
作为医院获得性BSI的重要病原体，铜绿假单胞菌的耐药机制涉及AmpC β-内酰胺酶表达上调、OprD孔蛋白缺失及MexAB-OprM等外排泵系统过度活化。尽管传统β-内酰胺类药物面临耐药挑战，C/T因其对染色体AmpC的稳定性，以及FDC通过铁载体转运的特殊机制，为治疗带来了新希望。

MATERIALS AND METHODS
研究采用BD Phoenix M50系统进行药敏检测，铁耗竭CAMHB培养基用于FDC MIC测定。通过实时定量PCR技术，定量分析oprD、ampC及mexA/X等基因表达水平，以PAO1标准株为参照进行归一化处理。统计学分析采用Wilcoxon秩和检验与多因素logistic回归模型。

RESULTS
药敏数据显示：亚胺培南(IPM)和美罗培南(MEM)敏感率分别为74.2%和80.4%。基因表达分析揭示：

1. oprD低表达与碳青霉烯类耐药显著相关(P<0.05)
2. ampC过表达导致TZP、CAZ耐药(OR=3.21-4.87)
3. mexA上调与ATM、MEM耐药密切关联
4. 唯一C/T中介耐药株显示ampC表达达551倍，远超敏感株(0.036-455倍)

DISCUSSION
研究证实：OprD缺失是碳青霉烯类耐药的主要驱动因素，尤其对IPM影响显著；而AmpC过表达与青霉素类和第三代头孢耐药直接相关。值得注意的是，MexAB-OprM外排泵对ATM耐药贡献突出。C/T和FDC对传统耐药机制表现出独特稳定性：

• C/T耐受AmpC水解的特性使其保持高效
• FDC通过铁摄取途径规避外排泵和孔蛋白缺陷的影响
  该发现为临床应对多重耐药铜绿假单胞菌BSI提供了关键治疗选择依据。

ACKNOWLEDGMENTS
本研究获日本化疗学会西部支部基础研究奖支持，凸显其在耐药菌防控领域的学术价值。未来研究需结合全基因组测序，深入解析耐药基因表达调控的分子基础。