miRNA-338-3p/miRNA-1250-5p/miRNA-3065-5p 簇：缺血性脑卒中潜在的关键调控因子

为探究 miRNA-338-3p/miRNA-1250-5p/miRNA-3065-5p 簇与缺血性脑卒中（IS）的关联，北川医学院附属医院研究人员开展相关研究。结果发现，IS 患者外周血单个核细胞中 miRNA-1250-5p 和 miRNA-3065-5p 表达显著升高，该簇或影响 IS 病情及预后12。

　　缺血性脑卒中（Ischemic stroke，IS）作为一种高发病率、高死亡率、高致残率和高复发率的疾病，给社会和家庭带来了沉重的健康和经济负担。其主要病理生理机制涉及细胞死亡、炎症、免疫激活以及微血管功能障碍等多个方面，而 IS 的预后与缺血事件发生时基因表达的转录调控紧密相关。MicroRNAs（miRNAs）作为一类在基因表达调控中发挥关键作用的小分子 RNA，在缺血 - 再灌注过程中具有重要意义。大约 25 - 48% 的 miRNAs 在人类基因组中以簇的形式存在，它们通过与靶信使 RNA 结合来调控基因表达，进而影响蛋白质表达和生物学功能。其中，miRNA-338-3p、miRNA-1250-5p 和 miRNA-3065-5p 属于同一簇，位于 17q25.3 染色体上凋亡相关酪氨酸激酶（AATK）基因的内含子中，以往研究表明它们在人类大脑中含量丰富，且参与多种细胞过程的调控，但它们在 IS 患者中的表达水平尚不明确。为了深入探究这一问题，北川医学院附属医院等机构的研究人员开展了相关研究，该研究成果发表在《Scientific Reports》上。

研究人员采用了病例对照研究方法，样本队列来源于 2020 年 7 月至 12 月北川医学院附属医院神经内科收治的 83 例 IS 患者（实验组）和 50 例健康志愿者（对照组）。研究中用到的主要关键技术方法包括：通过 Ficoll-Hypaque 密度梯度离心法从外周血样本中分离外周血单个核细胞（PBMCs）；利用 miRcute miRNA 分离试剂盒提取总 RNA，并用 NanoVue Plus 分光光度计和琼脂糖凝胶电泳评估 RNA 的纯度和完整性；运用实时定量逆转录聚合酶链反应（RT-qPCR）检测 miRNA-338-3p、miRNA-1250-5p、miRNA-3065-5p 的表达水平；借助 IBM SPSS 25.0 软件进行统计分析。

研究结果如下：

1. 实验组和对照组基线特征：实验组和对照组在性别和年龄方面无显著差异（P>0.05），这为后续研究结果的可靠性提供了基础3。
2. miRNA 表达差异：实验组和对照组的 miRNA-338-3p 表达水平无显著差异（P>0.05），但实验组的 miRNA-1250-5p 和 miRNA-3065-5p 表达水平显著高于对照组（P<0.05），表明这两种 miRNA 可能与 IS 存在关联4。
3. IS 组 miRNA 表达变化：在 IS 组中，miRNA-1250-5p 的表达水平在急性期（长达 7 天）升高，7 天后相较于基线下降（P<0.05）；出院时美国国立卫生研究院卒中量表（NIHSS）评分大于 3 的患者，其 miRNA-3065-5p 和 miRNA-338-3p 表达水平高于评分小于等于 3 的患者；出院改良 Rankin 量表（mRS）评分大于等于 3 的患者，miRNA-3065-5p 表达水平高于评分小于等于 2 的患者5。
4. miRNA 簇与 IS 的相关性：miRNA-3065-5p 的表达水平与 IS 患者的入院 NIHSS 评分和住院时间呈正相关；miRNA-338-3p 和 miRNA-3065-5p 的表达水平与出院 mRS 评分呈正相关；miRNA-338-3p/miRNA-1250-5p/miRNA-3065-5p 簇与中性粒细胞百分比呈正相关，与淋巴细胞百分比呈负相关，这表明该簇可能参与了 IS 的炎症反应调节6。
5. miRNA 之间的相关性：在 IS 患者中，miRNA-338-3p、miRNA-1250-5p 和 miRNA-3065-5p 的表达水平显著正相关，进一步证实了它们在 IS 中的协同作用7。
6. ROC 曲线分析：miRNA-338-3p、miRNA-1250-5p 和 miRNA-3065-5p 预测 IS 的受试者工作特征曲线（ROC）分析结果显示，它们的曲线下面积（AUC）分别为 0.553、0.659 和 0.737，表明这些 miRNA 在预测 IS 方面具有一定的价值8。

研究结论和讨论部分指出，miRNA-1250-5p 和 miRNA-3065-5p 在 IS 患者 PBMCs 中的表达水平显著高于对照组，提示它们可能参与了 IS 的病理过程。虽然 miRNA-338-3p 在本研究中未显示出与对照组的显著差异，但由于其在其他研究中的争议性结果以及可能存在的表达部位和调控机制差异，仍需进一步研究。miRNA-338-3p、miRNA-1250-5p 和 miRNA-3065-5p 之间存在显著正相关，且与炎症细胞百分比相关，表明它们可能通过调节免疫细胞极化、凋亡、炎症反应或促进血管生成等机制，参与 IS 的病理生理过程，影响疾病的严重程度和预后，有望成为 IS 治疗的潜在干预靶点。然而，该研究也存在一定局限性，如样本量较小、单中心研究且未对 miRNA 簇在同一患者中的动态变化进行检测。未来需要进一步开展大样本、多中心的研究，以深入探究 miRNA-338-3p/miRNA-1250-5p/miRNA-3065-5p 簇在 IS 中的作用机制，为 IS 的治疗提供更有力的理论依据和潜在治疗靶点910。