利用乳酸杆菌核苷脱氧核糖基转移酶 II 型酶促合成具有生物活性的 2'- 脱氧尿苷 5 - 取代类似物：开启核苷类药物绿色合成新征程

为解决生物活性核苷的合成问题，研究人员开展了利用乳酸杆菌核苷脱氧核糖基转移酶 II 型（NDTs）进行酶促转糖基化的研究。结果显示获得了高产量的生物活性 2'- 脱氧尿苷衍生物，这有助于开发环保的生化方法制备重要的修饰核苷。

　　核苷脱氧核糖基转移酶（NDTs）和核苷磷酸化酶（NPs）属于糖基转移酶类，可在温和条件下通过酶促转糖基化反应，遵循 “绿色化学” 原则制备具有生物活性的核苷。酶促转糖基化是一种立体和区域特异性反应，能获得高纯度的目标核苷，可与化学合成方法相媲美。在本研究中，利用乳酸杆菌（Lactobacillus leichmannii）核苷脱氧核糖基转移酶 II 型，通过酶促转糖基化进行合成。反应体系中，7 - 甲基 - 2^'- 脱氧鸟苷作为碳水化合物部分的供体，相应修饰的嘧啶杂环碱作为受体。反应条件为受体 / 供体摩尔浓度比 1:3，在 25mM HEPES 缓冲液（pH 7.4）中进行酶促转糖基化反应。对于 5-CF₃-Ura 和 5-Vin-Ura，目标核苷的生成速率较低。由于 NDT II 具有更广泛的底物特异性，成功获得了无法用大肠杆菌胸苷磷酸化酶（E. coli TP）合成的 5-CF₃-dUrd。5-F-Ura、5-Cl-Ura 和 5-I-Ura 的产率（转化率）为定量，5-Vin-Ura 为 68%，5-CF₃-Ura 为 67%。最终获得了高产量的具有生物活性的 2^'- 脱氧尿苷衍生物，其中三种目前已用于抗病毒和抗肿瘤的临床治疗。所选用的酶催化剂、底物的初始摩尔浓度比以及所选的核苷供体（碳水化合物残基的来源），有助于开发环保的生化方法来制备具有实际重要意义的修饰核苷。