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为解决癌症患者生育力保存问题，研究人员开展评估慢冻、玻璃化两种冷冻方法及常规培养基（DMEM）、含人睾丸细胞条件培养基（hTCCM）两种培养方法对人卵巢卵泡体外生长影响的研究。结果显示两种冷冻和培养方法在卵泡形态等方面相当，hTCCM 无明显优势，为后续研究提供参考。
在癌症治疗领域，随着医学技术的进步，越来越多的癌症患者得以长期生存。然而，化疗和放疗在杀死癌细胞的同时，也常常对患者的生殖系统造成严重损害，尤其是女性患者的卵巢功能。卵巢组织冷冻保存（OT freezing）成为了许多癌症患者保存生育力的希望。自 1960 年首次从冷冻保存的哺乳动物卵巢组织获得后代以来，这一技术不断发展，如今已常规用于癌症患者生育力保存。但传统的卵巢组织再移植方法，对于存在循环癌细胞的患者，如急性淋巴细胞白血病或卵巢癌患者，存在重新引入癌细胞的风险，因此体外生长和成熟（IVG 和 IVM）技术虽极具挑战，却成为了重要的研究方向。
此外，目前还有人工卵巢、癌细胞清除、通过异种移植实现卵母细胞成熟以及基于干细胞的卵子发生等生育力恢复策略在研究中，但都尚未进入临床试验阶段，且面临诸多伦理问题。在此背景下，研究人员来自伊朗拉夫桑贾恩医科大学（Rafsanjan University of Medical Sciences），开展了一项旨在评估人睾丸细胞条件培养基（hTCCM）对冷冻保存的人卵巢皮质片卵泡体外发育影响的研究，相关成果发表在《Cryobiology》杂志上。该研究对于探索癌症患者生育力保存的新途径意义重大，若能成功优化体外培养条件，将为那些无法进行卵巢组织移植的患者带来生育的希望。
研究人员采用了多种关键技术方法。首先，收集并处理样本，获取人睾丸细胞和卵巢组织样本。然后，进行细胞培养，制备 hTCCM，将卵巢组织切片分别采用慢冻和玻璃化两种方法冷冻保存，解冻后在不同培养基（DMEM、DMEM 添加 hTCCM）中培养。最后，对培养过程中的多个参数进行评估，包括卵泡募集、生长、形态、直径，激素（孕酮、雌二醇）分泌，以及相关基因（PTEN、BMP-15、PDGF、GDF-9、GAPDH）表达水平 。
研究结果
- 研究分组与卵泡培养情况：研究分组包括玻璃化冷冻的 20 条卵巢组织条，分别在 hTCCM 和 DMEM 培养基中培养；慢冻组的 18 条卵巢组织条，也分为两组进行培养。培养 10 天后，共 96 个直径大于 100μm 的卵泡继续培养 7 天。
- 冷冻和培养方法对卵泡的影响：两种冷冻方法和两种培养方法在卵泡形态和激素分泌方面无显著差异（P>0.05）。在 hTCCM 存在的情况下，玻璃化冷冻组卵泡募集加速（P>0.05）。培养 7 天后，慢冻 /hTCCM 组卵泡直径大于玻璃化冷冻 / DMEM 组。
- 基因表达情况：仅 BMP-15 基因表达谱在慢冻 /hTCCM 组与玻璃化冷冻 / DMEM 组存在显著差异。
- 培养最终成果：培养结束（超过 21 天）时，仅获得 3 个未成熟、质量较低的卵母细胞。
研究结论与讨论
本研究表明，玻璃化冷冻这种快速简便的方法与慢冻方法在冷冻保存卵巢组织方面效果相当。然而，精心制备的 hTCCM 补充剂并未对卵泡发育结果产生明显益处。在冷冻保存的卵巢皮质片体外成熟技术能够应用于临床之前，仍需开展进一步研究。该研究为癌症患者生育力保存的研究提供了重要参考，明确了当前技术的优势与不足，为后续优化体外培养条件、探索更有效的生育力保存方法指明了方向，有助于推动相关领域的发展，让更多癌症患者在对抗病魔的同时，保留生育后代的可能 。
