创新比色法：精准测定诺氟沙星（NFX），助力医药与生物研究

为解决诺氟沙星（NFX）分析方法存在步骤繁琐、试剂昂贵等问题，研究人员开展了诺氟沙星比色测定方法的研究。结果显示，开发的两种分光光度法简单、准确、经济，可用于生物样本和药物制剂中 NFX 的测定，为相关研究提供了有效手段。

　　在医学和药理学的广阔领域中，抗菌药物的作用至关重要。喹诺酮类抗菌药作为常用的抗感染药物，在人和动物疾病治疗方面发挥着关键作用。其中，氟喹诺酮类药物是一类广谱合成抗菌药，自 1962 年被偶然发现后，便广泛用于治疗各种感染性疾病。诺氟沙星（Norfloxacin，NFX）作为氟喹诺酮羧酸的衍生物，主要用于治疗泌尿系统和呼吸道感染。随着其使用范围的不断扩大，在临床和医学研究中，对 NFX 进行快速、精准的分析变得愈发重要。然而，现有的 NFX 分析方法，如高压液相色谱、薄层色谱等，存在步骤繁多、试剂昂贵、选择性差以及线性范围窄等问题。基于此，来自 Allama Iqbal Open University、Bacha Khan University 等机构的研究人员开展了相关研究，旨在开发出简单、经济、准确且环保的 NFX 检测方法。该研究成果发表在《BMC Pharmacology and Toxicology》上。

研究人员主要运用了分光光度技术来开展此项研究。在实验过程中，使用了高质量的试剂，并通过制备不同浓度的溶液进行实验。同时，利用 Shimadzu UV - 1800 双光束分光光度计测定吸光度。实验样本包括多种诺氟沙星药物片剂，以及添加了诺氟沙星的人血浆和尿液样本。

研究结果如下：

1. 方法建立：开发了两种分光光度法，即方法 A 和方法 B。方法 A 利用 Fe (III) 在酸性溶液中氧化 NFX，生成的 Fe (II) 与 1,10 - 菲啰啉形成橙红色络合物，在 511nm 处有最大吸光度；方法 B 则是在酸性介质中，Ce (IV) 与 NFX 反应，通过测定剩余的 Ce (IV) 与甲基橙反应后的吸光度（508nm）来确定 NFX 的含量。
2. 反应条件优化：对影响两种方法反应结果和颜色产物稳定性的多种实验条件进行了优化。例如，方法 A 中，确定了最佳加热时间为 15min、温度为 100°C，Fe (III) 溶液浓度为 0.002mol/L，1,10 - 菲啰啉溶液浓度为 0.014mol/L 等；方法 B 中，确定了使用 2.5mol/L 的 HNO₃、Ce (IV) 溶液浓度为 3×10^-3mol/L、甲基橙（MO）溶液浓度为 8×10^-3mol/L 等条件最优。
3. 分析性能评估：两种方法在理想实验条件下，NFX 吸光度与浓度均呈现良好的线性关系。方法 A 在 1 - 30μg/mL 浓度范围内，相关系数为 0.9879；方法 B 在 1 - 15μg/mL 浓度范围内，相关系数为 0.9966。方法 A 的检测限（LOD）为 1.098μg/mL，定量限（LOQ）为 2.875μg/mL；方法 B 的 LOD 为 1.111μg/mL，LOQ 为 3.368μg/mL。
4. 特异性和可靠性：研究表明，常用的药用辅料如葡萄糖、乳糖等对两种方法测定 NFX 均无干扰，说明方法具有良好的特异性。通过对纯 NFX、不同浓度 NFX 溶液以及药物制剂的多次测量，验证了方法的精密度和准确性，两种方法的回收率良好，相对标准偏差较低。
5. 适用性：两种方法成功测定了四种不同品牌药物制剂中的 NFX 含量，且结果与标签值相近。方法 B 还可用于测定添加了 NFX 的人血浆和尿液样本中的药物含量，回收率在可接受范围内。

研究结论与讨论部分指出，本研究开发的两种检测 NFX 的方法具有灵敏度高、快速、经济、选择性好等优点。与其他色谱法和已报道的分光光度法相比，无需繁琐的萃取和样品制备过程，使用的化学试剂价格低廉，实验设备易于获取。此外，药用辅料对分析结果无影响，方法的重现性高、回收率好，为测定商业片剂制剂和生物样本中的 NFX 含量提供了有价值的替代方法，在医药研发、临床检测等领域具有重要的应用前景。