3D 球体的纵向与终点特征序贯正交检测：推动三维生物学发展的关键技术

在多细胞 3D 球体（Spheroids）研究中，分析方法缺乏模块化，难以充分表型分析。研究人员开展相关研究，提出通过液体覆盖法将单细胞悬液自组装成 Spheroids，再用模块化框架进行多方面表型分析，这有助于推进三维生物学应用。

　　球体（Spheroids）是由健康或病理组织的细胞或细胞培养物重新聚集形成的多细胞三维结构。学术界和工业界对球体的基础及转化应用，促使多种实验设置和分析方法得以发展，但这些方法大多缺乏对球体进行最大程度表型分析的模块化能力。在此，研究通过液体覆盖法将单细胞悬液自组装成球体，随后建立一个对球体进行多方面表型分析的模块化框架。详细阐述了手动和自动化的细胞接种、上清液处理以及化合物添加流程。表型分析模块包含一系列正交检测方法，可对球体进行纵向和 / 或终点分析。纵向分析包括有无球体或细胞状态特定信息的形态测量，以及上清液评估（营养物质消耗和代谢物 / 细胞因子产生）。球体还可作为监测单细胞和集体细胞迁移及侵袭的起点。在终点时，球体被裂解、固定或解离为单细胞。终点分析可用于研究分子含量、单细胞组成和状态，以及具有空间细胞和亚细胞特定信息的结构。每个模块都考虑了时间要求和质量控制指标，以支持实验的可重复性。这些互补技术可供有细胞培养和基础分子生物学经验的研究人员轻松采用。预计该模块化方案将通过提供可扩展且互补的方法，推动三维生物学的应用。