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为探究胰腺癌相关血栓形成机制，台湾大学等机构研究人员开展了胰腺癌衍生微泡（MVs）及内在凝血因子在血栓形成中作用的研究。结果表明，TF、FVIII 和 FIX 与 MVs 诱导的血栓形成有关，TF 还促进肿瘤生长，为相关治疗提供新思路。
在癌症的世界里，有一种 “隐藏的杀手” 正威胁着无数患者的生命，它就是癌症相关血栓（CAT），尤其是静脉血栓栓塞（VTE）。这一并发症在癌症患者中极为常见，是导致癌症患者死亡的第二大原因，给患者带来了沉重的负担。其中，胰腺癌又被认为是最易引发血栓的癌症类型。
目前，虽然已经发现了一些预测 CAT 的因素，但对于其具体的发病机制仍未完全明晰。已知胰腺癌患者体内癌细胞、血浆或循环微泡（MVs）中的组织因子（TF）是血栓形成的主要原因。同时，在凝血过程中，TF 与因子 VIII（FVIII）、IX（FIX）相互关联，且 FVIII 还与血管性血友病因子（VWF）存在复杂的关系。然而，FVIII、FIX 和 VWF 在胰腺癌相关血栓形成中的具体作用，以及 FVIII 和 TF 对胰腺癌生长的影响，都还需要深入研究。
为了揭开这些谜团，来自台湾大学等机构的研究人员开展了一项极具意义的研究。他们通过构建不同 TF 表达水平的人胰腺癌细胞系，制备相应的微泡，并利用多种小鼠模型进行实验。最终发现，TF、FVIII 和 FIX 与癌细胞衍生的 MVs 诱导的血栓形成密切相关，而 VWF 在这一过程中作用有限。此外，TF 是促进肿瘤生长的关键因素，FVIII 虽与血栓形成有关，但对肿瘤生长并无明显影响。这一研究成果发表在《Thrombosis Journal》上，为深入理解胰腺癌相关血栓形成机制和肿瘤生长机制提供了重要依据，也为后续的治疗策略研发指明了方向。
研究人员主要运用了以下几种关键技术方法：一是构建细胞系，利用 CRISPR/Cas9 技术构建了 TF 基因敲除的细胞系，还通过转染 TF 表达质粒获得了 TF 过表达的细胞系；二是分离和检测微泡，运用超速离心等方法分离微泡，借助纳米颗粒跟踪分析（NTA）、透射电子显微镜（TEM）、TF 活性测定、蛋白质免疫印迹（Western blot）和流式细胞术等技术对微泡的特性、TF 表达及活性进行检测；三是建立小鼠模型，包括免疫缺陷小鼠、血友病 A（HA）小鼠、血友病 B（HB）小鼠和血管性血友病（VWD）小鼠模型，通过在小鼠体内注射微泡或癌细胞，观察血栓形成和肿瘤生长情况。
研究结果
- 细胞系和微泡特性：研究使用的四种人胰腺癌细胞系，AsPC-1TFhigh和 MIAPaCa-2TFhigh细胞系富含 TF，AsPC-1TFKO和 MIAPaCa-2TFlow细胞系 TF 含量低。从这些细胞系制备的微泡大小在 65 - 1265nm 不等，且 93 - 99% 的微泡在 100 - 1000nm 范围内，所有微泡均具有完整的磷脂膜，且都表达微泡表面标记 CD81。通过多种检测方法证实，不同细胞系来源的微泡 TF 表达和活性与预期基因型相符123。
- TF 阴性微泡和血友病小鼠血栓形成减少：向小鼠注射微泡并诱导下腔静脉（IVC）狭窄后，发现 TF 阳性微泡在野生型（WT）和 VWD 小鼠中诱导形成的 IVC 血栓较多，而在 HA 和 HB 小鼠中几乎不形成 IVC 血栓。TF 阴性微泡在所有小鼠中诱导形成的 IVC 血栓都很少。在肺部血栓形成方面，TF 阳性微泡在 WT 和 VWD 小鼠中诱导的肺部血栓数量较多，HA 和 HB 小鼠中较少；TF 阴性微泡在 WT 和 VWD 小鼠中诱导的肺部血栓数量较多，HA 和 HB 小鼠中显著减少，且 HA 和 HB 小鼠之间肺部血栓数量无明显差异456。
- TF 支持肿瘤生长和 IVC 血栓形成，FVIII 仅支持 IVC 血栓形成：将不同的胰腺癌细胞系原位注射到免疫缺陷小鼠（NSG）和免疫缺陷血友病 A 小鼠（NSG-HA）体内，5 周后观察发现，TFhigh的胰腺癌细胞生长速度明显快于 TFKO或 TFlow的细胞，但相同癌细胞在 NSG 和 NSG-HA 小鼠体内的生长情况无差异。在 IVC 血栓形成方面，TF 阳性癌细胞的 NSG 小鼠 IVC 血栓明显多于 NSG-HA 小鼠，TF 阴性癌细胞的 NSG 小鼠 IVC 血栓较少，NSG-HA 小鼠几乎不形成 IVC 血栓78。
研究结论与讨论
研究表明，TF、FVIII 和 FIX 与癌细胞衍生的 MVs 诱导的血栓形成有关，而 VWF 在这一过程中作用有限。同时，TF 和 FVIII 都与原位注射癌细胞诱导的血栓形成有关，但只有 TF 与肿瘤生长相关。这一结论与之前的一些研究结果相符，进一步证实了 TF 在胰腺癌血栓形成和肿瘤生长中的关键作用。
从临床角度来看，虽然目前的抗凝治疗可以预防和治疗 VTE，但并不能改善癌症患者的总体生存率。这可能是因为缓解高凝状态对癌症本身的生长没有影响。基于此，未来的研究可以探索抑制 TF 或 TF - FVIIa 复合物是否能在减少血栓形成的同时产生抗癌效果。该研究为深入了解胰腺癌相关血栓形成和肿瘤生长机制提供了重要线索，为开发更有效的治疗策略奠定了基础，有望在未来改善胰腺癌患者的预后。
