基于荧光免疫层析法的 B 族链球菌快速检测改良方法研究：助力围产期感染防控

为解决 B 族链球菌（GBS）常规检测耗时久、灵敏度低的问题，研究人员开展了基于荧光免疫层析法（FICT）的 GBS 快速检测研究。结果显示，FICT 条带经短期富集后检测灵敏度达 90.91%，特异性 95.35%，有望指导产科紧急情况下的 IAP 用药。

　　在妇产科领域，B 族链球菌（Group B streptococcus，GBS）就像一个隐藏在暗处的 “危险分子” 。GBS 是一种常见的机会致病菌，悄无声息地定植在人体的直肠阴道区域。对于孕妇而言，GBS 带来的麻烦可不少，它不仅会引发尿路感染、羊膜腔内感染等多种疾病，还可能导致早产、死产等严重后果。更令人担忧的是，大约 50% 的 GBS 定植孕妇在分娩时会将病原体垂直传播给新生儿，使得 GBS 成为新生儿早发型疾病（GBS-EOD）和晚发型疾病（GBS-LOD）的重要诱因，给母婴健康带来极大威胁。

目前，针对 GBS 感染的预防主要依赖于产前筛查和产时抗生素预防（Intrapartum antibiotic prophylaxis，IAP）。然而，传统的 GBS 检测方法存在诸多缺陷。常规的培养法需要 24 - 72 小时才能出结果，这在产科紧急情况下，根本无法满足临床需求，可能导致抗生素的过度使用或使用不足。而现有的光学免疫测定和酶免疫测定虽然能在几分钟内得出结果，但灵敏度欠佳，严重限制了其广泛应用。实时定量聚合酶链反应（Real-time quantitative polymerase chain reaction，qPCR）技术虽然准确性较高，但对设备、场地和操作人员的要求苛刻，在资源有限的环境中难以推广。因此，开发一种快速、灵敏且适用于临床紧急情况的 GBS 检测方法迫在眉睫。

为了攻克这一难题，厦门大学附属妇女儿童医院的研究人员展开了深入研究。他们致力于寻找一种能提高 GBS 筛查效率的策略，研发出了基于荧光免疫层析法（Fluorescence immunochromatographic test，FICT）的检测条带，并对其性能进行了全面评估。最终研究发现，FICT 条带结合短期 LIM 肉汤富集培养的改良检测方法，展现出了良好的应用前景，相关成果发表在《BMC Pregnancy and Childbirth》上。

在研究过程中，研究人员主要运用了以下几种关键技术方法：首先，通过制备 GBS-IgG 荧光微球和 DNP - 荧光微球标记复合物、抗 GBS 抗体与生物素的结合物，为 FICT 条带的构建奠定基础；其次，利用阴道 - 直肠拭子样本，进行培养鉴定、qPCR 检测以及胶体金免疫层析（Colloidal gold immunochromatography，GIC）测定，与 FICT 条带检测结果进行对比；最后，对样本进行 LIM 肉汤富集培养，进一步优化 FICT 条带的检测性能。

下面来具体看看研究结果：

• FICT 条带性能：FICT 条带的检测限在 10⁴ CFU/mL 至 10⁶ CFU/mL 之间。对 30 种不同血清型的 GBS 菌株进行检测时，多数菌株在 1.23×10⁴ CFU/mL 的浓度下能被准确检测，仅 1 株（GBS_5409，血清型 VI）在 1.23×10⁶ CFU/mL 时呈阳性。该条带对 48 小时富集培养的阳性样本检测准确率达 100%，且交叉反应测试未出现假阳性结果。
• 与其他方法实际应用对比：以培养法为金标准，直接使用 FICT 条带和 GIC 试剂盒检测临床直肠 - 阴道拭子样本时，二者特异性虽均达 100%，但灵敏度较低，分别为 34.48% 和 27.59%。qPCR 技术的灵敏度为 80.95%，高于 FICT 条带，但 qPCR 技术存在设备要求高、成本高、受实验室时间限制等问题。
• FICT 条带富集样本检测评估：对富集样本进行检测时，FICT 条带能检测出所有 24 小时富集培养的阳性样本，且比培养法提前 24 小时检测到 4 个样本，但存在 20% 的假阳性率。
• FICT 条带对 LIM 肉汤富集培养样本检测效能评估：对临床直肠 - 阴道拭子在 LIM 肉汤中培养 4 小时后进行检测，FICT 条带的灵敏度提升至 90.91%，特异性为 95.35%，与培养法相比，能多检测出 5 个样本，假阳性率为 11.90%。经过改良，FICT 条带检测的 κ 值提高到 0.771，与金标准具有较高的一致性。

综合来看，研究结论表明基于 FICT 条带的改良检测方法，通过短期 LIM 肉汤富集培养，显著提高了 GBS 检测的灵敏度和特异性，缩短了检测时间，能够满足临床紧急情况下的检测需求，为及时进行 IAP 用药提供了有力支持，在产前 GBS 筛查和产时检测中具有巨大的应用潜力。

在讨论部分，研究人员进一步分析了当前 GBS 检测面临的挑战。尽管 IAP 在预防新生儿 GBS 感染方面有一定效果，但 GBS-EOD 的发病率仍不容忽视。假阴性结果的出现，可能是由于产前 GBS 筛查的灵敏度低，或者产前与产时 GBS 定植状态存在差异。此外，部分孕妇入院到分娩时间短，无法完成传统培养检测，凸显了快速检测方法的重要性。虽然 qPCR 技术在检测 GBS 方面具有优势，但也存在局限性，相比之下，免疫检测结合富集培养是更具潜力的替代方法。

总的来说，这项研究为 GBS 检测提供了一种创新且有效的解决方案，有望改善围产期 GBS 感染的防控现状，降低母婴感染风险，保障母婴健康，对妇产科临床实践具有重要的指导意义。未来，随着技术的不断完善和优化，基于 FICT 条带的检测方法或许能在更多场景中发挥作用，为围产期医学的发展注入新的活力。