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为解决蘑菇栽培废料(SMS)和黄麻织物废料的处理问题,研究人员开展了利用 SMS 中漆酶(laccase)对黄麻织物进行脱木质素处理的研究。结果表明,优化提取使漆酶活性提高 1.47 倍,处理后黄麻织物木质素去除率达 61.1%。该研究为废料的可持续管理提供了新途径。
蘑菇,这种在山林间、餐桌旁常见的食材,背后却隐藏着一系列环境难题。随着全球对蘑菇需求的不断攀升,蘑菇栽培产业蓬勃发展,但由此产生的大量蘑菇栽培废料(Spent mushroom substrate,SMS)却成了棘手的 “负担”。据统计,欧洲每年产生的 SMS 超过 30 亿千克,处理这些废料不仅成本高昂,还面临着资源浪费的问题。与此同时,黄麻作为世界上使用量第二大的天然纤维,在工业应用中有着广泛前景,可用于制作地毯、袋子等。然而,黄麻织物在生产和处理过程中,需要耗费大量化学物质和能源去除木质素等非纤维素成分,这不仅增加了成本,还使得黄麻织物在生命周期末端难以管理,不符合可持续发展的理念。
为了解决这些问题,来自塞尔维亚、俄罗斯、芬兰等多个国家研究机构的研究人员展开了一项极具意义的研究。他们试图探索一种创新的双重可持续管理方法,将两种看似 “无用” 的废料 ——SMS 和黄麻织物结合起来,实现资源的再利用。这项研究成果发表在了《Scientific Reports》杂志上。
在研究过程中,研究人员主要运用了响应面法(Response surface methodology,RSM)、酶活性测定、部分纯化技术以及多种材料表征技术(如 ATR-FTIR 光谱分析、偏光显微镜观察等)。通过 RSM,他们系统研究了提取时间、pH 和温度等因素对漆酶(laccase)提取的影响;利用酶活性测定方法,精确衡量不同条件下漆酶的活性;部分纯化技术则用于获取更纯的漆酶,以便后续实验;而 ATR-FTIR 光谱分析和偏光显微镜观察等材料表征技术,帮助研究人员了解黄麻织物在酶处理前后的化学和物理变化。
模型拟合优化活性酶滤液
研究人员运用 RSM 考察了提取时间、pH 和温度这三个自变量对漆酶活性的影响。通过实验得到了不同条件下四种 SMS(分别来自平菇 Pleurotus ostreatus,简称 P-SMS;香菇 Lentinula edodes,简称 L-SMS;猴头菇 Hericium erinaceus,简称 H-SMS;灵芝 Ganoderma lucidum,简称 G-SMS)漆酶的活性数据。结果显示,该研究建立的二阶多项式模型能很好地拟合实验结果,决定系数(R2)大多高于 0.99,模型回归显著(p<0.05),失拟项不显著(p>0.05),表明回归方程可用于预测实验结果。
漆酶活性
实验测定了四种 SMS 的漆酶活性,发现 P-SMS 分离出的漆酶比活性最高(4716.33 mU/mg),H-SMS 的最低(35.51 mU/mg)。不同参数对不同来源漆酶活性的影响各异。例如,pH 对 P-SMS 漆酶提取影响最大,其活性先降低后升高;提取时间对 H-SMS 漆酶活性有正向影响,而对 L-SMS 和 G-SMS 漆酶活性有负面影响。根据实验数据,研究人员建立了预测四种 SMS 粗提物漆酶比活性的二阶多项式模型。
粗漆酶滤液提取的优化
研究旨在优化漆酶提取条件以获得最大活性。通过逐步优化,得到了酶活性和提取参数的最佳估计值。优化后的实验结果与预测值非常接近,验证了 RSM 模型的适用性。实验发现,较低温度(低于 10°C)和较高 pH 有利于漆酶提取,RSM 优化使漆酶活性提高了 1.47 倍。研究还发现不同蘑菇物种的 SMS 来源的漆酶结构和活性不同,P-SMS 的漆酶在部分纯化后比活性显著增加,基于此,研究人员选择 P-SMS 漆酶用于后续黄麻处理实验。
漆酶活性的最适温度和 pH
从 P-SMS 中提取的漆酶在 pH 4.5 时比活性最高,在 30 - 40°C 范围内酶活性最高且稳定性较好,温度高于 50°C 时,漆酶活性快速下降。
用部分纯化的 P-SMS 来源粗漆酶滤液处理的黄麻织物的化学变化
利用 ATR-FTIR 光谱分析、偏光显微镜观察和化学染色等方法研究黄麻织物在酶处理后的变化。ATR-FTIR 光谱显示,酶处理后与纤维素和半纤维素相关的峰强度增加,木质素和半纤维素与纤维素峰的比例下降,总结晶指数(TCI)降低,表明木质素被有效去除,纤维素和半纤维素暴露增加。偏光显微镜观察和化学染色结果也证实了木质素的去除。经测定,酶处理后黄麻织物的木质素含量从 13.48 ± 0.28% 降至 5.25 ± 0.19%,去除率达 61.1%,同时,处理后的黄麻织物手感更柔软、颜色更浅、润湿性更好。
SMS 和黄麻纤维的循环经济前景
SMS 和黄麻织物通常被视为废料,但研究表明它们具有再利用的潜力。从 SMS 中提取的漆酶可用于黄麻织物脱木质素处理,按优化工艺,每袋 2kg 的 P-SMS 可获得 8L 部分纯化酶,能处理约 2000m2的黄麻织物。欧洲每年丢弃大量 SMS,其与黄麻处理相结合的潜力巨大,符合欧盟循环经济计划。
综上所述,该研究成功将 SMS 和黄麻废料结合,实现了更可持续的废料管理。从四种商业生产的蘑菇物种的 SMS 中提取漆酶,通过 RSM 优化提取过程,使漆酶活性提高 1.47 倍。部分纯化的漆酶在温和条件下处理黄麻织物,有效去除了 61.1% 的木质素。该研究不仅为废料的可持续管理提供了新的思路和方法,还展示了循环经济在生物废料处理领域的巨大潜力,为相关产业的可持续发展提供了理论依据和实践指导。未来,研究人员可进一步优化黄麻脱木质素工艺,探索该技术在更广泛领域的应用,推动循环经济的发展。