《Cell Death & Disease》：Oncolytic peptide LTX-315 plus an anti-CTLA-4 antibody induces a synergistic anti-cancer immune response in residual tumors after radiofrequency ablation of hepatocellular carcinoma
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为解决恶性实体肿瘤射频消融（RFA）后肿瘤复发问题，研究人员开展了溶瘤肽 LTX-315 联合抗 CTLA-4 抗体抑制肝癌 RFA 后残余肿瘤的研究。结果显示该联合治疗可改善残余肿瘤免疫抑制微环境，诱导强烈抗肿瘤免疫，有望降低肿瘤复发率。
肝癌，作为全球范围内严重威胁人类健康的恶性肿瘤之一，其治疗手段一直是医学领域的研究热点。射频消融（Radiofrequency Ablation，RFA）凭借创伤小、疗效显著等优势，在早期肝癌治疗中广泛应用。然而，现实却给这一疗法泼了冷水。对于直径大于 3 厘米或位于高风险位置（靠近大血管、胆囊、胆管、胃肠道或膈肌）的肿瘤，RFA 很难实现完全消融，这就导致了高达 5 年的肿瘤复发率居高不下，成为困扰临床医生和患者的一大难题。不仅如此，不完全的 RFA 还可能加速残余肿瘤的进展，让本就艰难的 PD-1 免疫治疗雪上加霜。
在此困境之下，华中科技大学同济医学院附属协和医院的研究人员勇挑重担，开展了一项极具意义的研究。他们聚焦于溶瘤肽 LTX-315 联合抗细胞毒性 T 淋巴细胞抗原 - 4（Cytotoxic T Lymphocyte Antigen-4，CTLA-4）抗体在肝癌 RFA 后残余肿瘤治疗中的应用，相关成果发表在《Cell Death and Disease》杂志上。
为了深入探究这一联合治疗方案的效果，研究人员运用了多种关键技术方法。在体外实验中，他们从经不同处理的 Hepa1-6 肿瘤中提取 CD8+T 细胞，然后将其与 Hepa1-6 细胞及抗 CTLA-4 抗体共培养，通过酶联免疫斑点试验（ELISPOT）、流式细胞术、细胞计数试剂盒 - 8（CCK-8）等实验手段，评估 CD8+T 细胞对 Hepa1-6 细胞的细胞毒性。在体内实验方面，研究人员构建了小鼠原位肝癌模型，将实验小鼠分为 5 组，分别给予不同的处理，通过超声监测肿瘤生长、记录小鼠生存情况、进行组织病理学分析、蛋白质免疫印迹法（Western blot）、实时荧光定量聚合酶链式反应（qRT-PCR）等多种实验技术，全面探究联合治疗的效果及潜在机制。
研究结果令人振奋。体外实验表明，LTX-315 联合抗 CTLA-4 抗体显著增强了 CD8+T 细胞对 Hepa1-6 细胞的细胞毒性。具体表现为，单独的不完全 RFA（iRFA）会使残余肿瘤中 CD8+T 细胞的 PD-1 和 CTLA-4 表达显著增加，而添加 LTX-315 后，PD-1 表达明显降低，CTLA-4 表达显著升高。ELISPOT 检测发现，该联合治疗组中 IFN-γ+CD8+T 细胞的比例相较于其他 6 组显著增加，同时，Hepa1-6 细胞的凋亡率达到最高，细胞活力降至最低。此外，联合治疗还诱导了免疫原性细胞死亡（Immunogenic Cell Death，ICD），激活了 cGAS-STING 通路，使 Hepa1-6 细胞中相关蛋白和细胞因子的表达及分泌显著增加。
体内实验结果同样出色。在建立小鼠原位肝癌模型后，研究人员发现，接受 iRFA + LTX-315 + 抗 CTLA-4 抗体三联联合治疗的小鼠，肿瘤体积最小，生存时间显著延长。在远隔效应测试中，该联合治疗对肝外肿瘤生长的抑制作用明显强于其他 4 组，表明其能诱导强大的系统性免疫。在再次挑战试验中，三联联合治疗组对再次接种肿瘤的生长抑制效果最佳，且脾脏中记忆 CD8+T 细胞（CD44+CD8+T 细胞）的比例显著高于其他组，证明其可诱导强烈的免疫记忆。进一步研究发现，该联合治疗激活了 cGAS-STING 通路，诱导了 ICD，使残余肿瘤中成熟树突状细胞（CD80+CD86+DC 细胞）的比例和 ICD 相关蛋白的表达显著增加，同时提升了肿瘤微环境中 M1 样肿瘤相关巨噬细胞（M1-TAMs）、CD8+T 细胞、TNF-α+CD8+T 细胞、IFN-γ+CD8+T 细胞和自然杀伤细胞（NK 细胞）的数量，降低了调节性 T 细胞（Tregs）、髓源性抑制细胞（MDSCs）和 M2 样肿瘤相关巨噬细胞（M2-TAMs）的浸润，显著改善了免疫抑制微环境，诱导了强烈的抗肿瘤免疫反应。
研究结论和讨论部分指出，LTX-315 联合抗 CTLA-4 抗体对肝癌 iRFA 后的残余肿瘤治疗效果显著且安全。联合治疗可协同改善残余肿瘤的免疫抑制微环境，诱导强烈的抗肿瘤免疫。其作用机制可能是通过协同激活 cGAS-STING 通路，引发 I 型干扰素反应，招募并激活多种免疫效应细胞；同时联合诱导残余肿瘤发生 ICD，促进树突状细胞成熟，触发适应性抗癌免疫反应。此外，安全性评估显示，联合治疗对主要器官功能无不良影响，且该组小鼠的肝功能指标谷丙转氨酶（ALT）和谷草转氨酶（AST）显著低于其他组。
这项研究为肝癌 RFA 后残余肿瘤的治疗开辟了新的道路，有望降低恶性实体肿瘤 RFA 后的肿瘤复发率，为临床治疗提供了新的策略和方向，具有重要的临床应用价值和深远的研究意义，为肝癌患者带来了新的希望。
