CD14 与 NFKB-1：调控 THP-1 细胞促炎细胞因子体外生成的关键 “把关人” 及科研新启示

为探究 THP-1 细胞分化产生促炎细胞因子（IL-6、IL-1β、TNF-α）的有效性，研究人员开展相关研究。结果显示，通过监测 PMA、LPS 浓度，调控培养基条件及检测 CD14、NFKB-1 基因水平，可有效生产促炎细胞因子，为相关研究提供重要依据。

　　THP-1 细胞系常被用作体外模型来研究单核细胞和巨噬细胞的功能。在这项研究中，研究人员在体外评估了通过佛波醇 12 - 肉豆蔻酸酯 13 - 乙酸酯（PMA）诱导 THP-1 细胞分化，再用脂多糖（LPS）处理，进而产生促炎细胞因子白细胞介素 - 6（IL-6）、白细胞介素 - 1β（IL-1^β）和肿瘤坏死因子 -α（TNF-α）的有效性。经形态学评估和细胞附着百分比测定，发现至少 10 ng/ml 的 PMA 就足以诱导 THP-1 细胞分化并使其贴壁。通过实时聚合酶链反应（RT-qPCR）分析巨噬细胞表面特异性抗原 CD14 基因，证实了 PMA 处理后 THP-1 细胞获得了类似巨噬细胞的特性，结果显示，与未处理的细胞相比，PMA 处理 48 小时后基因表达明显上调。其次，在 PMA 处理后，无论含血清还是无血清条件下，经 24 小时静止期，再用 LPS 处理 6 小时后，NFKB-1 基因表达开始增加，且无血清条件下的表达明显高于含血清条件。此外，RT-qPCR 结果表明，LPS 处理 24 小时后，促炎细胞因子持续显著上调。蛋白质免疫印迹（Western blot）分析也证实了 LPS 处理 24 小时后促炎细胞因子水平的上调。总体而言，研究结果表明，通过仔细监测 PMA 和 LPS 浓度、调控细胞生长培养基条件，以及检测 CD14 和 NFKB-1 基因水平，可在体外有效从 THP-1 细胞中产生促炎细胞因子。简而言之，CD14 和 NFKB-1 基因是 THP-1 细胞来源的促炎细胞因子产生过程中的重要检查点。