小细胞肺癌中 CXCR6+CD8+ T 细胞在低剂量放疗联合免疫治疗中的动态演变与抗肿瘤机制探索

为解决小细胞肺癌（SCLC）患者预后差，T 细胞变化轨迹及相关机制不明等问题，研究人员开展 “Dynamic evolution and antitumor mechanisms of CXCR6+CD8+ T cells in small cell lung cancer treated with low?dose radiotherapy and immunotherapy” 主题研究，发现肿瘤特异性 CXCR6+CD8+ T 细胞可改善患者预后，为 SCLC 治疗提供新思路。

　　在医学的抗癌战场上，小细胞肺癌（Small Cell Lung Cancer，SCLC）堪称 “劲敌”。它是一种源于支气管黏膜神经内分泌细胞的罕见且侵袭性极强的癌症，恶性程度高，病情发展迅速，多数患者在一线治疗后 1 年内就会出现胸内复发或进展。免疫疗法的出现，虽为肿瘤治疗带来新希望，但 SCLC 独特的 “免疫冷” 肿瘤微环境（Tumor Microenvironment，TME），却极大地限制了免疫疗法的效果。

放疗与免疫疗法联合应用，展现出协同效应，尤其是低剂量放疗（Low-Dose Radiotherapy，LDRT）联合免疫检查点抑制剂（Immune Checkpoint Inhibitors，ICIs），能增强肿瘤细胞免疫原性，改善抗原呈递，促进 CD8⁺T 细胞向肿瘤内浸润，显著延长患者生存期。然而，CD8⁺T 细胞在这一过程中的动态演变、促进其浸润的机制以及增强细胞毒性功能的原理，都还是未解之谜。

为解开这些谜团，四川大学华西医院的研究人员展开了深入研究。他们利用 Kaede 小鼠追踪技术，结合多种实验方法，对接受放免联合治疗的 SCLC 小鼠模型进行研究，并分析临床队列数据。

研究结果发现：

1. 免疫细胞的动态迁移：研究人员构建了带有标记的 SCLC 荷瘤 Kaede 小鼠模型，通过光转换标记肿瘤引流淋巴结（Tumor-Draining Lymph Node，TDLN）细胞。结果显示，在治疗后，TDLN 持续向肿瘤部位输送免疫细胞，“Kaede red” CD45⁺细胞在肿瘤内的比例不断增加，其中 “Kaede red” CD8⁺T 细胞和 “Kaede red” 自然杀伤（Natural Killer，NK）细胞的趋势与之一致，在治疗后第 8 天达到肿瘤浸润高峰。
2. T 细胞的分化轨迹：对肿瘤组织进行单细胞 RNA 测序，发现从 TDLN 迁移到肿瘤部位的是 “na?ve”/“stem-like” CD8⁺T 细胞，它们在肿瘤内分化为效应 CD8⁺T 细胞。通过 PAGA 轨迹分析等方法，确定了 CD8⁺T 细胞的分化轨迹为 CD8T2→CD8T1→CD8T3→CD8T4→CD8T5，且随着分化，“stem-like” 模块基因表达下降，细胞毒性和共抑制模块基因表达增加。
3. CXCR₆⁺CD8⁺ T 细胞的关键作用：研究发现，CXCR6 可作为 CD8⁺T 细胞分化为效应细胞的标记，CXCR₆⁺CD8⁺ T 细胞具有更强的细胞毒性。在多种治疗方案实验中，联合治疗组肿瘤内 CXCR₆⁺CD8⁺ T 细胞比例显著高于 LDRT 单独治疗组。对 SCLC 患者的研究表明，高浸润的 CXCR₆⁺CD8⁺ T 细胞与更好的预后相关，是独立的预后指标，且高浸润组可能对免疫治疗更敏感。
4. DCs 的重要作用：肿瘤内浸润的 DCs 是促进 T 细胞分化的重要免疫细胞。实验发现，DCs 与 CXCR₆⁺CD8⁺ T 细胞存在显著相关性，DC2（CXCL16⁺DC）与 CD8T4（CXCR₆⁺CD8⁺ T 细胞）之间有强烈的相互作用。体外共培养实验证实，DCs 能促进 stem-like T 细胞分化为效应 CD8⁺T 细胞。

这项研究意义重大。它揭示了 SCLC 在放免联合治疗过程中，CD8⁺T 细胞的动态演变过程和抗肿瘤机制，明确了 DCs 在 T 细胞分化中的关键作用，以及肿瘤特异性 CXCR₆⁺CD8⁺ T 细胞在抗肿瘤免疫中的重要意义。为未来 SCLC 的治疗策略提供了新方向，如可通过增强肿瘤微环境中活化 DCs 和 CXCR₆⁺CD8⁺ T 细胞的浸润来提高治疗效果。

研究人员主要采用了以下关键技术方法：

1. 动物模型构建：构建 SCLC 荷瘤小鼠模型，包括使用带有特定基因缺失和过表达的 PRM 细胞系，接种到小鼠体内形成肿瘤。
2. 光转换追踪技术：利用 Kaede 小鼠，对 TDLN 细胞进行光转换标记，追踪免疫细胞在 TDLN 和肿瘤部位之间的动态迁移。
3. 单细胞 RNA 测序：对肿瘤组织中的细胞进行单细胞 RNA 测序，分析细胞类型、基因表达差异以及细胞分化轨迹等。
4. 临床数据研究：收集并分析 SCLC 患者的临床和病理特征数据，构建免疫细胞特征，评估 CXCR₆⁺CD8⁺ T 细胞与患者预后的关系。

综上所述，该研究通过一系列实验和分析，深入探讨了小细胞肺癌在低剂量放疗联合免疫治疗中的免疫细胞动态变化和抗肿瘤机制，为改善 SCLC 患者的治疗效果提供了重要的理论依据，对推动小细胞肺癌的临床治疗发展具有重要意义。