巨噬细胞外泌体miRNA-204通过靶向RUNX2改善血管钙化的AT2受体机制研究

本研究针对血管钙化(VC)这一难治性心血管并发症，苏州大学附属第二医院团队通过共培养大鼠主动脉平滑肌细胞(RASMCs)与巨噬细胞，首次揭示AT2受体激动剂C21通过上调巨噬细胞外泌体miRNA-204-5p表达，靶向抑制RUNX2 mRNA，进而阻断Wnt/β-catenin信号通路，显著改善磷酸盐诱导的血管钙化。该发现为临床干预血管钙化提供了新靶点，发表于《Cellular and Molecular Life Sciences》。

　　

血管钙化(VC)如同血管系统的"石化危机"，是心血管疾病患者死亡的重要推手。当血管壁中的平滑肌细胞异常转化为骨样细胞，就会引发矿物质沉积，但目前临床仍缺乏有效干预手段。更棘手的是，近年研究发现巨噬细胞这个"炎症指挥官"会通过分泌外泌体参与钙化进程，但具体机制仍是未解之谜。与此同时，血管紧张素II的2型受体(AT2R)虽被发现具有抗钙化潜力，其与巨噬细胞的"跨界对话"机制却从未被阐明。

苏州大学附属第二医院心血管内科团队在《Cellular and Molecular Life Sciences》发表的研究，首次揭开了这个"三重谜题"。研究人员构建了磷酸盐诱导的血管钙化模型，采用Transwell共培养系统连接大鼠主动脉平滑肌细胞(RASMCs)与肺泡巨噬细胞，通过外泌体分离鉴定、miRNA干扰、双荧光素酶报告基因等关键技术，系统解析了AT2R激动剂C21通过调控巨噬细胞外泌体miRNA-204-5p改善血管钙化的分子机制。

研究结果呈现三大突破性发现：

1. "巨噬细胞放大器效应"现象：在"巨噬细胞-RASMCs共培养体系"部分，磷酸盐刺激使钙化程度比单独培养RASMCs增加31%，而AT2R激动剂C21能更显著逆转共培养系统的钙化，同时抑制BMP-2、OCN等成骨标志物及Wnt3a/β-catenin信号通路激活。

2. "巨噬细胞极化开关"机制：在"巨噬细胞极化与炎症"部分，C21将磷酸盐诱导的M1/M2巨噬细胞比例从3.2倍降至1.8倍，虽然同时降低IL-1β、TNF-α等促炎因子和IL-10、TGF-β等抗炎因子，但更显著抑制促炎因子释放。

3. "外泌体miRNA导弹"靶点：在"外泌体miRNA-204-5p功能验证"部分，C21使巨噬细胞外泌体miRNA-204-5p表达提升2.1倍，通过双荧光素酶实验证实其直接靶向RUNX2 mRNA的3'UTR区域，沉默该miRNA会使C21的抗钙化效果减弱40%。

这项研究首次绘制出"AT2R-巨噬细胞外泌体-miRNA-204/RUNX2"的分子调控网络，为临床提供了三重启示：其一，AT2R激动剂可能成为逆转血管钙化的新选择；其二，巨噬细胞极化状态可作为治疗监测指标；其三，外泌体miRNA-204-5p或成为无创诊断标志物。研究不仅填补了血管钙化领域"免疫-代谢"交叉调控的理论空白，更开辟了通过调控细胞外囊泡治疗血管病变的新途径。

未来研究需在人类血管组织样本和动脉粥样硬化模型中验证该机制，并探索外泌体miRNA的递送技术。值得关注的是，AT2R激动剂C21已获孤儿药资格，本研究为其拓展心血管适应症提供了重要理论依据，具有显著的临床转化前景。