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在干基质斑点（DMS）分析中，免疫化学方法检测皮质醇存在困难。研究人员以山羊的全血、血浆、牛奶和尿液为样本，对比纤维素膜和玻璃纤维膜。结果显示玻璃纤维膜在皮质醇回收率和重复性上更优。该研究为 DMS 中皮质醇检测提供了重要参考。
在生命科学和健康医学领域，生物样本的检测与分析至关重要。干血斑（DBS）技术自上世纪五六十年代兴起，如今已广泛应用于多种生物样本的处理。它具有诸多优势，比如所需样本体积小、便于储存和运输，且无需冷链。但目前在 DBS 样本分析中，免疫化学方法的应用却受到限制。
就拿皮质醇（Cortisol）来说，它作为一种糖皮质激素，在人类和动物体内都有着重要作用。通过检测血液、尿液、唾液和毛发中的皮质醇含量，能帮助监测疾病、评估急慢性应激状态，在动物研究中还可用于探究行为和福利问题。然而，在 DBS / 干基质斑点（DMS）中检测皮质醇，主要依赖物理化学仪器方法，针对免疫化学方法检测皮质醇或其代谢物的研究却很少。这就好比在生物样本检测的道路上，免疫化学方法遇到了 “拦路虎”，使得我们对皮质醇的检测不够全面和便捷。
为了解决这些问题，俄罗斯的研究人员开展了一项针对皮质醇 ELISA（酶联免疫吸附测定，Enzyme-Linked Immunosorbent Assay）检测程序的研究。他们将目光聚焦在山羊的全血、血浆、牛奶和尿液等多种干燥生物流体上，对比了两种不同的膜支持物 —— 纤维素和玻璃纤维，从野外样本采集和分析的便利性、检测重现性、分析物回收率以及样本稳定性等多个方面进行探究。
这项研究的重要意义不容小觑。它为在 DMS 样本中准确检测皮质醇提供了新的思路和方法，有助于推动免疫化学方法在皮质醇检测领域的应用，从而为疾病监测、动物应激评估等工作提供更可靠的技术支持。该研究成果发表在《Analytical Biochemistry》上。
在研究方法上，研究人员主要采用了以下关键技术：首先是样本采集与处理技术，采集距离实验室 150km 外的样本，利用纤维素 blotting paper 和玻璃纤维膜分别制备 DMS 和条带干燥样本；其次，使用 ELISA - cortisol kit 对不同样本中的皮质醇进行定量检测。
研究结果如下：
- 不同样本形式的比较：条带干燥样本在皮质醇回收、重现性、干燥样本等分便利性上优于干燥斑点样本。在皮质醇定量 ELISA 检测中，“条带干燥全血 / 天然血浆” 和 “条带干燥尿液 / 天然尿液” 这两组结果的一致性最佳。条带干燥的血液、血浆和尿液样本与液体样本中皮质醇结果的相关系数在 0.90 - 0.97 之间（p<0.001），表明二者相关性良好。
- 不同吸收支持物的差异：在纤维素膜上点样的血液和血浆样本，其皮质醇平均回收率远低于条带干燥的血液和血浆样本，仅在 40 - 60% 之间。这说明纤维素膜在皮质醇回收方面表现较差。
- 高皮质醇含量样本的变化：皮质醇含量高（> 400 nmol/L）的干燥血浆样本，回收的皮质醇浓度平均略有下降，降低了 20% 。这提示高皮质醇含量样本在检测时可能存在一定的特殊性。
- 样本稳定性：干燥的血液、血浆和牛奶样本在 4oC 下可稳定保存 6 个月，在 37oC 下可稳定保存 1 周，在 60oC 下可稳定保存 24 小时。这为样本的保存和运输提供了重要的时间参考。
研究结论和讨论部分强调了玻璃纤维膜在皮质醇 ELISA 检测中的优势。与纤维素纸相比，玻璃纤维膜能提供更好的定量 ELISA 结果，其在皮质醇回收率和重现性上表现更优。而且，纤维素材料对于不同生物流体有不同的分布模式（斑点面积），这会导致用于分析的纸盘切片中皮质醇浓度不同，并且在样本处理时，纤维素材料需要耗费时间和人力进行打孔操作，而条带干燥样本的等分则更加容易，使用镊子即可完成。这些发现为后续在生物样本中检测皮质醇提供了更科学、更便捷的方法选择，对于完善皮质醇检测技术体系、推动相关研究和应用的发展具有重要意义。
