综述：CRISPR-Cas9与CRISPR干扰技术在自身免疫性疾病治疗中的作用

这篇综述系统探讨了CRISPR-Cas9和CRISPRi（CRISPR interference）技术在自身免疫性疾病（如RA、SLE、T1DM等）治疗中的突破性潜力，对比传统免疫抑制疗法（如TNF-α抑制剂）的局限性，提出基因编辑可精准调控免疫相关靶点（如HLA、PD-1），并分析临床转化面临的脱靶效应、免疫原性等挑战。

　　

CRISPR-Cas9/CRISPRi与类风湿性关节炎
类风湿性关节炎（RA）的病理核心在于滑膜成纤维细胞和T淋巴细胞介导的慢性炎症。CRISPR-Cas9通过靶向编辑促炎细胞因子基因（如TNF-α、IL-6），或利用CRISPRi沉默HLA-DR⁺免疫细胞的关键信号分子，显著降低关节破坏。动物模型中，基于胞外囊泡递送的CRISPR系统成功修复了滑膜组织的基因缺陷。

CRISPR-Cas9/CRISPRi与炎症性肠病
炎症性肠病（IBD）的肠道屏障功能障碍与NOD2/CARD15基因突变密切相关。CRISPR技术通过修复肠上皮细胞紧密连接蛋白编码基因（如OCLN），或抑制TLR4/NF-κB通路过度激活，在克罗恩病小鼠模型中实现黏膜愈合。值得注意的是，靶向肠道菌群的CRISPRi策略可特异性消除促炎菌株（如Enterobacteriaceae），重塑微生态平衡。

系统性红斑狼疮的基因干预
SLE的异质性抗体产生与B细胞过度活化相关。研究证实，CRISPR-Cas9敲除B细胞受体基因BCR或表观遗传调控因子DNMT3A，可减少抗dsDNA抗体分泌。而CRISPRi通过dCas9-KRAB复合物抑制干扰素基因刺激因子STING的表达，阻断I型干扰素风暴，显著改善狼疮肾炎的肾损伤。

多发性硬化症的神经免疫调控
MS的脱髓鞘病变涉及CD4⁺ T细胞对髓鞘碱性蛋白（MBP）的异常攻击。实验显示，CRISPR编辑T细胞受体（TCR）可变区或FoxP3⁺调节性T细胞，能抑制中枢神经系统浸润。近期临床试验中，CRISPRi沉默髓鞘抑制因子Nogo-A的表达，促进少突胶质细胞再生，为神经修复提供新思路。

1型糖尿病的β细胞保护策略
针对T1DM，CRISPR-Cas9通过删除胰岛β细胞表面的HLA-I类分子，避免CD8⁺ T细胞识别。更创新的CRISPRi设计靶向CTLA-4/PD-1免疫检查点，增强调节性T细胞功能，在非肥胖糖尿病（NOD）小鼠中实现长达6个月的胰岛素分泌维持。

临床转化挑战与突破
尽管存在脱靶风险（如Rohatgi团队发现的sgRNA种子序列错配问题），高保真Cas9变体（如HiFi-Cas9）和碱基编辑技术显著提升安全性。目前，NCT05859997试验利用CRISPR编辑CAR-T细胞（靶向CD19⁺ B细胞）治疗难治性SLE，初步实现“深度缓解”。未来需解决递送效率（如AAV载体优化）和伦理争议（生殖细胞编辑）等瓶颈。