小鼠安全学习能力的年龄与性别特异性调控机制及其对恐惧焦虑障碍治疗的启示

本研究针对青少年期高发的焦虑障碍及性别差异现象，通过建立小鼠安全学习（safety learning）模型，系统探究了年龄（青春期PND 29-34 vs成年期PND 69-128）与性别对条件性抑制（conditioned inhibition）能力的影响。研究发现雌性小鼠在恐惧辨别（discriminative conditioning）中冻结行为更多、区分能力较弱，且对新颖线索表现出更高的恐惧泛化（fear generalization）；青春期小鼠则普遍存在安全线索利用障碍。神经活动标记（cFos）显示前额叶皮层（PFC）与腹侧海马（vHPC）的发育差异及性别特异性激活模式。该成果为焦虑障碍的精准化治疗提供了重要行为与神经机制依据。

　　

研究背景与意义
恐惧反应的正确定位对生存至关重要，但过度恐惧会导致焦虑障碍等病理状态。全球约25%青少年受焦虑困扰，且女性发病率是男性的两倍。传统暴露疗法基于恐惧消退（fear extinction）原理，但消退记忆易复发，尤其青少年消退学习保留能力较差。安全学习（safety learning）通过建立明确的安全线索（safety cues）实现条件性抑制（conditioned inhibition），可避免记忆竞争问题。然而，青春期雌性动物的安全学习能力及其神经机制尚属空白。

关键技术方法
波士顿大学团队采用C57BL6J小鼠（雌雄各半），分青春期和成年组进行四天辨别训练（恐惧线索vs安全线索+足底电击US），通过求和测试（summation test）验证条件性抑制，并引入新线索测试泛化。部分小鼠进行扩展求和测试后取脑，通过cFos免疫组化分析前额叶皮层（PFC）、杏仁核、海马和压后皮层（RSC）的神经活动。

研究结果
1. 辨别训练
所有组别均能区分恐惧与安全线索（F_(1,138)=698.65, p<0.001），但雌性冻结更多、区分度更低（η_p²=0.84）。青春期小鼠冻结水平普遍高于成年组。

2. 求和测试
安全线索均能抑制恐惧反应，但雌性抑制幅度较小。青春期组（无论性别）无法有效利用安全线索抑制恐惧，提示发育期执行功能受限。

3. 扩展测试
雌性对新线索表现更高恐惧泛化，反映性别特异性注意偏向。cFos显示青春期PFC/vHPC激活更强，雄性RSC/vHPC活动更显著。

结论与意义
该研究首次证实青春期雌性小鼠具备安全学习能力，但存在性别与年龄特异性行为模式：雌性恐惧泛化倾向更强，青少年执行功能不成熟影响安全线索利用。神经机制上，PFC-vHPC-RSC环路的功能差异可能是关键靶点。这些发现为开发针对青少年和女性的焦虑干预策略（如安全线索强化训练）提供了理论依据，同时提示需考虑非性激素机制的性别差异成因。论文发表于《Behavioural Brain Research》，为恐惧调节的发育神经生物学研究树立了新范式。