KAP1通过结合HNRNPAB激活Hippo/YAP1信号通路促进胃腺癌进展的机制研究

为解决胃腺癌(GAC)腹膜转移(PC)预后差和治疗选择有限的问题，研究人员开展了KAP1在GAC进展中作用机制的研究。通过分析596例原发GAC和72例PC样本，发现核KAP1高表达与不良预后相关。研究揭示KAP1通过结合HNRNPAB调控YAP1转录，降低H3K27ac水平，促进肿瘤干细胞特性和转移。靶向KAP1/YAP1的ASOs在体内显著抑制肿瘤生长，为GAC治疗提供了新策略。

　　

胃腺癌(GAC)是全球范围内严重的健康威胁，每年新增病例超过百万。尽管诊断和治疗手段有所进步，但患者的5年生存率仍低于30%，尤其是发生腹膜转移(PC)的患者预后更差。PC在诊断时约20%的患者中存在，后续发展中可达45%，且目前治疗选择有限，成为临床面临的重大挑战。因此，深入理解GAC进展的分子机制，寻找新的治疗靶点迫在眉睫。

在这项发表于《Cancer Letters》的研究中，来自MD Anderson癌症中心等机构的研究团队聚焦于转录调控因子KAP1在GAC中的作用。KAP1作为转录中介因子1(TIF1)家族成员，在免疫、转录调控和DNA修复等过程中发挥重要作用，但其在GAC中的具体机制尚不清楚。研究人员通过大规模临床样本分析、分子生物学实验和动物模型，系统阐明了KAP1通过Hippo/YAP1信号通路促进GAC进展的新机制，为开发靶向治疗策略提供了重要依据。

研究采用了多种关键技术方法：对596例原发GAC和72例PC样本进行免疫组化分析；通过全外显子测序(WES)和RNA测序分析CDH1突变与KAP1表达的关系；利用单细胞RNA测序(scRNA-seq)和质谱技术鉴定KAP1相互作用蛋白；建立稳定敲低/过表达细胞系进行功能实验；使用染色质免疫沉淀(ChIP)分析KAP1与YAP1启动子的结合；开发靶向KAP1和YAP1的反义寡核苷酸(ASO)进行体内治疗实验。

研究结果部分：

3.1. CDH1突变/loss导致GAC患者PC中KAP1激活
通过对43例PC样本的WES和RNA-seq分析发现，CDH1突变患者中KAP1表达显著上调。596例GAC组织芯片显示KAP1高表达与不良预后相关，尤其在弥漫型GAC中更为明显。

3.2. scRNA-seq和质谱分析显示KAP1主要在肿瘤细胞中表达
单细胞分析证实KAP1在肿瘤细胞簇中高表达，而在基质或免疫细胞中表达有限。质谱分析发现KAP1在GAC细胞系和PC样本中富集，而相关蛋白TRIM24未显示相同模式。

3.3. KAP1驱动PC进展并与YAP1呈正相关
KAP1敲低显著抑制GAC细胞生长和肿瘤球形成，而过表达则促进这些表型。临床数据分析显示KAP1与YAP1表达显著相关，且两者共表达患者预后最差。

3.4. KRAB结构域表达抑制GAC细胞中KAP1表达
表达ZFP568的KRAB结构域(不含DNA结合锌指)可抑制KAP1和YAP1表达，显著减少体外克隆形成和体内肿瘤生长。

3.5. KAP1通过结合YAP1启动子促进其转录
KAP1通过其BCC结构域结合YAP1启动子，降低H3K27ac水平，激活YAP1转录。ChIP-seq证实KAP1在YAP1和TEAD1基因组区域的富集。

3.6. 质谱鉴定KAP1相互作用蛋白HNRNPAB
质谱和免疫共沉淀证实KAP1与RNA结合蛋白HNRNPAB相互作用，共同调控YAP1信号。scRNA-seq显示KAP1与HNRNPAB在肿瘤细胞中协同表达。

3.7. KAP1和YAP1联合抑制增强抗肿瘤效果
靶向KAP1和YAP1的ASOs单独或联合使用，联合治疗显示出最强的肿瘤生长抑制作用。

这项研究系统阐明了KAP1在GAC进展中的关键作用及其分子机制。研究发现KAP1通过结合HNRNPAB形成转录激活复合物，调控YAP1表达和Hippo信号通路活性，进而促进肿瘤干细胞特性和转移。临床数据分析证实KAP1高表达与不良预后显著相关，尤其在弥漫型GAC和PC患者中更为突出。

研究的重要意义在于：首次揭示了KAP1在GAC中从转录抑制因子转变为激活因子的分子转换；阐明了KAP1-HNRNPAB-YAP1轴在GAC进展中的核心作用；开发了靶向这一通路的KRAB结构域和ASOs治疗策略，为临床转化提供了实验基础。特别是针对PC这一难治性转移灶的治疗策略，可能为改善GAC患者预后开辟新途径。

研究的局限性在于尚未完全阐明CDH1突变与KAP1上调之间的直接分子联系，这将是未来研究的重要方向。此外，KRAB结构域和ASOs的临床转化仍需更多临床前评估。总体而言，这项研究为理解GAC的分子机制和开发靶向治疗提供了重要线索，具有显著的临床转化潜力。