Periplakin（PPL）通过重编程CD44Low细胞为CD44High肝脏祖细胞缓解肝纤维化的机制研究

本研究针对肝纤维化治疗中肝脏祖细胞（LPCs）来源机制不明的难题，揭示了细胞骨架蛋白Periplakin（PPL）通过激活Notch/AKT/mTOR通路，驱动CD44Low胆管上皮细胞（BECs）逆分化为CD44High LPCs，显著减轻CCl4、DDC和血吸虫诱导的肝纤维化。单细胞测序和移植实验证实PPL+CD44High LPCs的强效抗纤维化作用，为肝病治疗提供新靶点。

　　

肝纤维化是慢性肝损伤的共同病理结局，目前临床治疗手段有限。尽管肝脏祖细胞（LPCs）被认为能通过再生修复受损肝组织，但其来源和调控机制仍是未解之谜。中山大学附属第一医院的研究团队发现，细胞骨架连接蛋白Periplakin（PPL）在纤维化肝脏中异常高表达，并通过独特机制激活LPCs扩增，相关成果发表于《Cellular and Molecular Gastroenterology and Hepatology》。

研究采用CCl₄、3,5-二乙氧基羰基-1,4-二氢可力丁（DDC）饮食和日本血吸虫感染构建小鼠肝纤维化模型，结合人纤维化肝组织样本。通过腺病毒介导的PPL过表达、单细胞RNA测序（scRNA-seq）、荧光激活细胞分选（FACS）和细胞移植等关键技术，系统解析了PPL的生物学功能。

研究结果

PPL在肝纤维化中表达上调
免疫组化和qPCR证实，PPL在人和小鼠纤维化肝脏中显著升高，且与LPCs标志物CK19/EpCAM共定位。在血吸虫感染模型中，PPL表达随纤维化进展动态变化，修复期出现大量PPL⁺管状细胞。

PPL过表达缓解肝纤维化
腺病毒递送PPL使CCl₄、DDC和血吸虫模型小鼠的纤维化面积减少40%-60%，血清ALT/AST水平下降，α-SMA表达降低，提示PPL具有肝保护作用。

PPL特异性表达于LPCs
超分辨显微镜显示PPL⁺细胞与CD44⁺ LPCs共定位，新生儿肝脏中PPL富集于CK19⁺EpCAM⁺胎儿肝祖细胞，暗示其参与干细胞维持。

PPL驱动CD44^Low向CD44^High转化
scRNA-seq发现PPL⁺细胞分化为CD44^Low BECs和CD44^High LPCs亚群。拟时序分析显示PPL通过激活Notch/ERK/WNT通路启动分化，依赖BMP/Redox/AKT-mTOR维持干细胞特性。

PPL⁺CD44^High LPCs移植疗效显著
DDC模型小鼠接受PPL⁺CD44^High细胞移植后，纤维化面积减少50%，效果优于CD44^Low组，证实LPCs的治疗潜力。

结论与意义
该研究首次阐明PPL通过重编程BECs获得LPCs特性，其机制涉及Notch/AKT/mTOR通路协同调控。这一发现不仅解释了LPCs的起源问题，更为肝纤维化提供了新的治疗策略——靶向PPL促进内源性LPCs扩增或直接移植PPL⁺CD44^High细胞。研究为肝硬化、胆管疾病等终末期肝病的细胞治疗奠定理论基础，具有重要转化价值。