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布鲁氏菌病（Brucellosis）是全球公共卫生威胁，现有检测方法存在不足。研究人员开发基于布鲁氏菌新田鼠种（B. neotomae）脂多糖（LPS）的竞争 ELISA（cELISA）。该方法灵敏、特异、重复性好，与商业试剂盒相比有优势，有助于家畜布鲁氏菌病防控。
布鲁氏菌病，这个隐藏在动物与人类健康背后的 “神秘杀手”，正悄然影响着全球公共卫生安全。它是由布鲁氏菌属（
Brucella）引发的人畜共患病，每年都有大量新增病例，据估算，全球每年至少有 160 - 210 万新的人类感染病例，远远超出以往报道数据。主要的感染风险因素就像一个个 “危险信号”，包括接触感染动物的组织和体液，以及食用未经巴氏消毒的患病家畜奶制品，特别是牛羊等家畜。
目前，在检测家畜布鲁氏菌病时，常用的血清学方法就像一道道 “关卡”，但这些 “关卡” 并不完美。世界动物卫生组织（WOAH）推荐的玫瑰孟加拉试验（RBT）、补体结合试验（CFT）和间接酶联免疫吸附试验（iELISA）等，经常会因为与其他革兰氏阴性菌（如大肠杆菌、沙门氏菌和小肠结肠炎耶尔森菌）发生交叉反应，产生假阳性结果，导致检测结果不准确，就像在迷雾中寻找真相，容易迷失方向。而基于单克隆抗体的竞争酶联免疫吸附试验（cELISA），本应是更精准的 “导航仪”，可现有的商用 cELISA 试剂盒主要使用从流产布鲁氏菌（B. abortus）和马尔他布鲁氏菌（B. melitensis）中提取的光滑脂多糖（S - LPS）作为诊断抗原，这两种菌属于生物安全 3 级病原体，培养它们需要高等级生物安全设施，操作复杂且成本高昂，使得检测工作困难重重。
为了攻克这些难题，研究人员开始了一场 “探索之旅”。虽然文中未提及具体研究机构，但他们积极行动起来，开展了一项关于开发基于布鲁氏菌新田鼠种（B. neotomae）脂多糖（LPS）的 cELISA 检测家畜布鲁氏菌病的研究。布鲁氏菌新田鼠种是生物安全 2 级病原体，操作相对简便，而且它与致病性布鲁氏菌在 S - LPS 表位上高度保守，具备用于血清学诊断的潜力。研究结果令人惊喜，新开发的 cELISA 展现出卓越的性能，检测限更低，在检测针对马尔他布鲁氏菌和流产布鲁氏菌的血清时，比商用试剂盒的分析灵敏度高 2 - 4 倍；与其他细菌感染的血清无交叉反应；诊断敏感性和特异性均达到 100%；变异系数小于 10%。在与商用试剂盒对比中，对 427 份接种家畜血清和 696 份未接种家畜血清检测的一致性分别达到 92.51% 和 96.98%。这一成果意义重大，为家畜布鲁氏菌病的诊断提供了更高效、可靠的工具，就像为防控工作装上了 “精准雷达”，对家畜布鲁氏菌病的防控有着重要推动作用，相关研究发表在《Analytical Biochemistry》杂志上。
研究人员开展这项研究时，用到了几个关键技术方法。首先是采用酚水法提取布鲁氏菌新田鼠种的 LPS，并通过银染色和与阳性血清反应进行鉴定。然后是建立并优化 cELISA，确定最佳反应条件。血清样本来源于接种和未接种家畜，为研究提供了丰富的数据支持。
下面来详细看看研究结果：
- 布鲁氏菌新田鼠种 LPS 的提取与鉴定：通过酚水法成功提取布鲁氏菌新田鼠种的 LPS，银染色呈现梯状条带模式，并且该 LPS 能与针对流产布鲁氏菌和马尔他布鲁氏菌的阳性血清发生免疫反应，这表明成功提取的 LPS 具备与阳性血清结合的能力，为后续检测奠定了基础。
- 竞争 ELISA 的建立与优化：研究人员对 cELISA 的各项条件进行优化，确定了最佳抗原包被浓度、血清稀释度等反应条件，使得该检测方法的性能达到最优，为准确检测提供了保障。
- 方法学评价：新开发的 cELISA 在检测限上表现出色，比商用试剂盒更灵敏；与其他细菌感染血清无交叉反应，保证了检测的特异性；诊断敏感性和特异性均为 100%，变异系数小于 10%，说明该方法准确性高、重复性好，是一种可靠的检测手段。
- 临床样本检测：在对大量接种和未接种家畜血清的检测中，新 cELISA 与商用试剂盒相比，展现出较高的一致性，进一步证明其在实际临床检测中的适用性和可靠性。
研究结论表明，基于布鲁氏菌新田鼠种 LPS 的 cELISA 具有优秀的敏感性、特异性和重复性，在检测家畜布鲁氏菌病方面表现卓越，具有很大的临床应用潜力，有望成为家畜布鲁氏菌病诊断的重要工具。在讨论部分，研究人员指出布鲁氏菌属种类繁多，新物种不断被发现，布鲁氏菌病的防控形势依然严峻。而本研究开发的 cELISA 为家畜布鲁氏菌病的诊断提供了新的思路和方法，在生物安全操作更简便的情况下，能实现高效、准确检测，对于家畜布鲁氏菌病的早期诊断和防控具有重要意义，就像在黑暗中点亮了一盏明灯，为防控工作指引了方向，为保障家畜健康和公共卫生安全提供了有力支持。
