白藜芦醇抗癌新发现：靶向 NORAD/Igf2bp2/Pdk1 通路抑制口腔鳞癌进展

在肿瘤研究领域，口腔鳞状细胞癌（OSCC）的治疗备受关注。为探究白藜芦醇对 OSCC 的作用，研究人员以 CAL-27 等细胞系为对象开展研究。结果发现，白藜芦醇可抑制 OSCC 细胞增殖，影响 NORAD/IGF2BP2/PDK1 通路。这为 OSCC 治疗提供新思路。

　　在肿瘤的世界里，肿瘤细胞就像一群不受控制的 “疯狂生长者”，它们肆意增殖、扩散和转移，严重威胁着人类健康。口腔鳞状细胞癌（Oral Squamous Cell Carcinoma，OSCC）便是其中一员，它在口腔肿瘤中较为常见，严重影响患者的生活质量和生存率。目前，针对 OSCC 的治疗手段虽有多种，但效果仍不尽人意，寻找新的治疗策略迫在眉睫。

近年来，天然成分在肿瘤治疗中的作用逐渐受到关注。白藜芦醇（Resveratrol）作为一种天然植物活性成分，具有潜在的抗肿瘤特性，然而其对 OSCC 的具体作用及机制尚不明确。浙江中医药大学口腔医学院的研究人员敏锐地捕捉到这一研究空白，开展了一项旨在探究白藜芦醇对 OSCC 影响的研究，相关成果发表在《Discover Oncology》杂志上。

此次研究意义重大，若能明确白藜芦醇对 OSCC 的作用机制，将为开发新的抗癌药物和治疗方案提供理论依据，有望为 OSCC 患者带来新的希望。

研究人员为开展此项研究，运用了多种关键技术方法。细胞实验方面，采用 MTT 法检测细胞增殖抑制率，以评估白藜芦醇对肿瘤细胞生长的影响；利用流式细胞术（Flow Cytometry，FCM）分析细胞周期，探究白藜芦醇对细胞周期的调控作用；借助蛋白质芯片技术和 Western blot 检测蛋白质表达水平，明确相关信号通路的变化。同时，运用 RNA 干扰（RNA interference）技术，敲低特定基因的表达，进一步验证基因在肿瘤发展中的作用。

下面来详细看看研究结果：

1. 白藜芦醇对 OSCC 细胞系的抑制作用：通过 MTT 法检测不同浓度白藜芦醇对 CAL-27、KB 和 SCC-25 细胞系的抑制效果，发现 50、100、200、400μg/mL 的白藜芦醇对 CAL-27 细胞，100、200、400μg/mL 的白藜芦醇对 KB 细胞，25、50、100、200、400μg/mL 的白藜芦醇对 SCC-25 细胞的抑制率均有所增加。其中，CAL-27 细胞对白藜芦醇最为敏感，IC₅₀值为 70μg/mL。这表明白藜芦醇能有效抑制 OSCC 细胞的生长，且不同细胞系对其敏感性存在差异。
2. 白藜芦醇对 CAL-27 细胞周期的影响：使用不同浓度白藜芦醇处理 CAL-27 细胞，FCM 分析结果显示，50μg/mL 白藜芦醇可诱导 CAL-27 细胞发生 G₂/M 期阻滞（P<0.05），100μg/mL 白藜芦醇能使细胞发生 S 期和 G₂/M 期阻滞（P<0.05），同时 G₀/G₁期细胞数量减少。这说明白藜芦醇可通过调控细胞周期，抑制 CAL-27 细胞的增殖。
3. 白藜芦醇对 CAL-27 细胞蛋白表达的影响：运用蛋白质芯片技术，研究人员发现 100μg/mL 白藜芦醇处理 CAL-27 细胞后，107 种磷酸化和非磷酸化蛋白质中有 13 种发生显著变化（P<0.05）。其中，cPKCα 和 Notch4 蛋白水平上调，而 p-ERK、p-PDK1、p-Cdc2、p-RB、NORAD、IGF2BP2、CDK2、Cdc2P34、Cyclin E、14 - 3 - 3beta 和 XIAP 等蛋白表达下调。这表明白藜芦醇可能通过调节这些蛋白的表达，影响相关信号通路，进而抑制肿瘤细胞的生长。
4. NORAD 对癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响：利用 RNA 干扰技术敲低 CAL-27 细胞中 NORAD 的表达，结果显示，与对照组相比，si-NORAD-1 和 si-NORAD-2 组细胞在 48h、72h 和 96h 的增殖能力明显减弱；细胞划痕愈合实验和 Transwell 侵袭实验表明，敲低 NORAD 表达后，细胞的迁移和侵袭能力显著下降（P<0.05）。这说明 NORAD 在癌细胞的增殖、迁移和侵袭过程中发挥着重要作用，白藜芦醇可能通过下调 NORAD 的表达抑制肿瘤的发展。
5. IGF2BP2 对癌细胞增殖和侵袭能力的影响：在 HSC3 和 CAL-27 细胞系中沉默 IGF2BP2 的表达，CCK-8 实验结果显示，IGF2BP2 基因敲除组细胞的增殖速率显著下降（P<0.001），在 HSC3 和 CAL-27 细胞中分别降至 69.13% 和 74.01%；Transwell 侵袭实验表明，敲除 IGF2BP2 后，细胞的侵袭能力也明显降低（P<0.001），在 HSC3 和 CAL-27 细胞中分别下调至 72.85% 和 52.44%。这表明 IGF2BP2 在癌细胞的增殖和侵袭过程中起促进作用，白藜芦醇通过下调 IGF2BP2 的表达，抑制了肿瘤细胞的恶性行为。
6. PDK1 对肿瘤细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响：CCK8 增殖实验发现，干扰 PDK1 表达后，下咽癌细胞的增殖活性下降，而过表达 PDK1 则使其增殖活性显著增强（P<0.05）。细胞迁移和侵袭实验结果显示，过表达 PDK1 可促进口腔鳞癌细胞的迁移和侵袭，而干扰其表达则抑制这些过程。这说明 PDK1 在肿瘤细胞的增殖、迁移和侵袭过程中起重要作用，白藜芦醇通过抑制 PDK1 的表达，阻碍了肿瘤细胞的生长和转移。

综合上述研究结果，研究人员得出结论：白藜芦醇能够抑制口腔鳞状细胞癌的增殖，尤其是对 CAL-27 细胞效果显著。其作用机制主要是通过影响 NORAD、IGF2BP2 和 PDK1 通路，改变细胞周期蛋白的表达，导致细胞发生 S 期和 G₂/M 期阻滞，从而抑制肿瘤细胞的生长和转移。

在讨论部分，研究人员指出，白藜芦醇在 OSCC 治疗中展现出巨大的潜力，但目前对于其诱导细胞凋亡的具体机制在学术界尚未达成共识。同时，本研究主要聚焦于对 CAL-27 细胞的研究，未来还需进一步探究白藜芦醇对其他敏感性较低细胞系的作用，以优化基于白藜芦醇的治疗方案。

这项研究为白藜芦醇作为抗癌药物的开发和应用奠定了坚实的基础，为口腔鳞状细胞癌的治疗提供了新的方向和潜在的治疗靶点，有望在未来的临床实践中为患者带来更好的治疗效果，改善患者的预后。