编辑推荐:
为探究 ASF1 对拟南芥端粒的影响,研究人员分析了 TERT 及相关蛋白表达,测量突变体端粒长度。结果发现 ASF1 突变导致端粒缩短和基因表达改变,且端粒缩短可能不依赖端粒酶。该研究为理解端粒维持机制提供新视角。
真核细胞中的 DNA 会与组蛋白一起组装成染色质。组蛋白伴侣有助于组蛋白在染色质上的添加和去除。ASF1(Anti-Silencing Function 1)是一种高度保守的组蛋白伴侣,与 H3.1 和 H3.3 组蛋白变体相关。在拟南芥(Arabidopsis thaliana)中,ASF1 缺失会导致染色质中 H3 组蛋白变体重新分布。端粒是位于真核染色体末端的短重复序列和蛋白质的复合体,拟南芥的端粒富含 H3.3。因此,可以推测 ASF1 可能在拟南芥端粒中发挥重要作用。
在这项研究中,研究人员探究了拟南芥端粒参数因 ASF1 缺失而发生的变化。他们利用实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)分析了端粒酶亚基 TERT(Telomerase Reverse Transcriptase)以及端粒相关蛋白 CTC1、POT1a、TRB1 和 BT2 的表达谱。通过单色多重 qPCR 测量了拟南芥愈伤组织培养物中 ASF1a 和 ASF1b 同源物的单突变体和双突变体的相对端粒长度。
研究观察到,ASF1 同源物的突变导致拟南芥愈伤组织中端粒缩短,并且端粒相关基因的表达发生改变。TERT 表达降低或不变却无法阻止端粒缩短,这一发现表明,在 ASF1 缺失的情况下,端粒缩短可能独立于端粒酶发生。