丹参酮 IIA：对抗塑化剂致卵巢损伤的新希望

当前，不孕问题愈发严峻，塑化剂三邻甲苯基磷酸酯（TOCP）导致女性卵巢功能受损却缺乏有效疗法。研究人员探究丹参酮 IIA对 TOCP 损伤卵巢的治疗作用，发现其可恢复卵巢结构和功能，调节多条信号通路，为化学性卵巢损伤治疗提供新策略。

　　在当今社会，不孕问题就像一片笼罩在许多家庭头顶的乌云，给无数人带来了困扰。据统计，全球范围内，不孕影响着 15 - 20% 的夫妇，到 2024 年，受影响人数高达 1860 万，已然成为全球第三大常见疾病。而在我国，这一问题也日益突出，不孕率在十年间从 12% 飙升至 18%，约 5000 万人深受其害。在众多导致不孕的因素中，环境中的有毒物质逐渐引起了人们的关注，尤其是像三邻甲苯基磷酸酯（TOCP）这样的塑化剂。TOCP 广泛应用于塑料、润滑剂和阻燃剂等产品中，人们在日常生活中很容易通过吸入、摄入或皮肤接触等方式接触到它。研究发现，女性体内检测到的尿 TOCP 水平往往高于男性，而且它对人体多个器官都有毒性，在女性生殖系统方面，它会损害颗粒细胞功能、诱导卵母细胞线粒体功能障碍，进而导致卵泡闭锁和激素失衡，严重影响卵巢功能。然而，令人遗憾的是，目前针对 TOCP 诱导的卵巢损伤，还没有获批的有效治疗方法。

在这样的背景下，南昌大学的研究人员展开了一项极具意义的研究。他们将目光聚焦于传统中药中的活性成分丹参酮 II_A，旨在探究丹参酮 II_A对 TOCP 诱导的小鼠卵巢损伤是否具有治疗作用，以及其背后潜在的信号传导机制。经过一系列深入研究，研究人员发现，丹参酮 II_A能够显著改善 TOCP 诱导的卵巢功能障碍。这一研究成果发表在《Journal of Ovarian Research》上，为化学诱导的卵巢损伤治疗提供了新的潜在策略，给众多受相关问题困扰的人们带来了新的希望。

研究人员为开展此项研究，运用了多种关键技术方法。在动物实验方面，选取 6 - 8 周龄的雌性 balb/c 小鼠，构建 TOCP 暴露模型，并设置不同处理组。通过形态学分析、血清激素水平检测等实验来评估卵巢的结构和功能变化。在机制研究中，运用网络药理学预测丹参酮 II_A的潜在靶点，借助蛋白质 - 蛋白质相互作用（PPI）网络分析、基因本体（GO）和京都基因与基因组百科全书（KEGG）富集分析挖掘关键通路。同时，利用蛋白质免疫印迹（Western blot）、免疫组织化学（IHC）、末端脱氧核苷酸转移酶介导的 dUTP 缺口末端标记（TUNEL）等实验技术，从分子和细胞层面深入探究丹参酮 II_A的作用机制。

下面来看具体的研究结果：

• 丹参酮 II_A恢复 TOCP 引起的卵泡发育损伤：通过对小鼠卵巢组织进行形态学观察和卵泡计数发现，TOCP 暴露会使卵巢组织结构出现明显异常，多种卵泡数量显著减少，闭经情况增多。而丹参酮 II_A处理后，卵巢组织形态得到明显改善，各类卵泡数量增加，尤其是高浓度丹参酮 II_A处理组效果更为显著，这表明丹参酮 II_A对 TOCP 诱导的卵巢卵泡发育损伤具有良好的恢复作用。
• 丹参酮 II_A恢复 TOCP 诱导的雌性小鼠性激素紊乱及相关蛋白表达：ELISA 检测血清性激素水平发现，TOCP 暴露导致小鼠血清中抗苗勒管激素（AMH）和促卵泡生成素（FSH）水平显著降低，雌激素（E2）水平升高。经丹参酮 II_A处理后，这些性激素水平得到有效恢复，接近正常对照组水平。免疫组化和 Western blot 分析也证实，丹参酮 II_A能够上调卵巢组织中 AMH 和 FSH 受体（FSHR）的表达，表明丹参酮 II_A可以有效恢复 TOCP 诱导的性激素紊乱和相关蛋白表达异常。
• 丹参酮 II_A改善 TOCP 诱导的颗粒细胞活力、增殖和类固醇生成酶损伤：CCK - 8 实验和 EdU 增殖实验表明，TOCP 会抑制颗粒细胞的活力和增殖，而丹参酮 II_A能够缓解这种抑制作用。此外，TOCP 暴露会使颗粒细胞中类固醇生成急性调节蛋白（STAR）表达上调，导致类固醇生成失调，丹参酮 II_A则可剂量依赖性地降低 STAR 表达，恢复孕酮 / 雌激素平衡，说明丹参酮 II_A可通过调节类固醇生成酶来对抗 TOCP 引起的卵巢类固醇生成失衡。
• 基于网络药理学预测丹参酮 II_A治疗 TOCP 损伤的潜在靶点：通过多个数据库检索，研究人员确定了丹参酮 II_A的潜在靶点和 TOCP 损伤相关靶点，经分析得到 23 个交集靶点。进一步的 PPI 网络分析和富集分析发现，这些靶点主要涉及细胞凋亡、丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通路和磷脂酰肌醇 3 - 激酶 / 蛋白激酶 B（PI3K/AKT）信号通路等，为后续研究提供了重要线索。
• 丹参酮 II_A抑制 TOCP 诱导的卵泡凋亡：TUNEL 检测和 Western blot 分析结果显示，TOCP 暴露会导致卵巢中凋亡卵泡数量增加，促凋亡蛋白 BAX 表达上升，抗凋亡蛋白 BCL - 2 表达下降。而丹参酮 II_A处理后，卵巢中凋亡卵泡减少，BAX 表达降低，BCL - 2 表达升高，表明丹参酮 II_A能够抑制 TOCP 诱导的卵巢细胞凋亡。
• Hippo 通路在丹参酮 II_A治疗 TOCP 诱导的卵巢功能障碍中发挥作用：研究发现，TOCP 暴露会使卵巢中磷酸化 Yes 相关蛋白（P - YAP）/YAP 比值升高，Hippo 通路下游靶点 CCN1 和 CCN2 表达降低。丹参酮 II_A处理后，高浓度组 P - YAP/YAP 比值显著下降，CCN2 表达呈剂量依赖性增加，说明丹参酮 II_A可通过调节 Hippo 通路来改善 TOCP 诱导的卵巢功能障碍。
• 丹参酮 II_A逆转 TOCP 诱导的 AKT、P38 和 ERK1/2 信号通路抑制：Western blot 分析表明，TOCP 暴露会使卵巢组织中 P - AKT/AKT、P - P38/P38 和 P - ERK1/2/ERK1/2 比值显著降低，而丹参酮 II_A处理后这些比值显著升高。分子对接技术也证实丹参酮 II_A与 AKT、P38 和 ERK 具有较强的结合能力，说明丹参酮 II_A可能通过激活 PI3K/AKT、ERK 和 P38 MAPK 信号通路来减轻 TOCP 诱导的卵巢损伤。

综合研究结论和讨论部分，本研究首次证实了丹参酮 II_A可以通过多种机制对抗塑化剂诱导的卵巢毒性。它不仅能够恢复卵泡发育和性激素平衡，还能通过协调调节 Hippo - PI3K/AKT - MAPK 信号轴抑制过度凋亡，逆转异常激活的 Hippo 通路。这一研究成果为治疗环境因素导致的卵巢损伤建立了新的多靶点治疗范式。然而，目前的研究仍存在一定的局限性，未来的研究可以进一步聚焦于开发卵巢特异性的药物递送系统，如纳米颗粒载体，以提高药物疗效并减少全身不良反应。同时，探索与其他草药成分的协同配方，优化治疗方案，有望为临床治疗提供更安全、有效的策略，为解决不孕相关问题带来更多的可能性。