RUNX2/ITGBL1轴介导HBV诱导肝纤维化的分子机制及维生素D3的干预作用

本研究针对慢性乙型肝炎（CHB）患者肝纤维化持续进展的临床难题，揭示了HBV通过上调转录因子RUNX2激活ITGBL1表达，进而促进肝星状细胞（HSCs）活化的分子机制。研究人员通过体内外实验证实，RUNX2直接结合ITGBL1启动子增强其转录，而维生素D3和CADD522可通过抑制RUNX2阻断该通路。该发现为CHB相关肝纤维化提供了新的治疗靶点，发表于《Virology Journal》。

　　

慢性乙型肝炎病毒（HBV）感染仍是全球重大公共卫生问题，尽管抗病毒治疗取得进展，但肝纤维化仍是影响患者预后的关键因素。肝纤维化过程中，肝星状细胞的异常活化导致细胞外基质过度沉积，但HBV如何调控这一过程的分子机制尚不明确。尤其令人困惑的是，部分患者即使实现病毒学抑制，纤维化仍持续进展，提示存在独立于病毒复制的致病通路。

复旦大学基础医学院的研究团队发现，整合素β样蛋白1（ITGBL1）在CHB患者肝组织中显著高表达，且与纤维化分期正相关。前期研究已证实ITGBL1通过激活TGF-β通路促进HSCs活化，但其上游调控机制仍是空白。本研究创新性地发现，HBV通过上调Runt相关转录因子2（RUNX2）激活ITGBL1表达，从而驱动肝纤维化进程。

研究采用多组学技术验证假说：通过GSE84044队列数据分析发现RUNX2与ITGBL1表达显著相关；利用染色质免疫沉淀（ChIP）和双荧光素酶报告基因证实RUNX2直接调控ITGBL1启动子；在AAV-HBV小鼠模型和HepAD38细胞中观察到HBV复制与RUNX2/ITGBL1轴激活同步；采用维生素D₃和CADD522抑制RUNX2可阻断ITGBL1诱导的HSCs活化标志物α-SMA和COL1A1表达。

HBV增强肝癌细胞和小鼠模型中ITGBL1表达
在可诱导HBV表达的HepAD38细胞中，撤除四环素后ITGBL1蛋白水平显著升高。rAAV8-1.3xHBV小鼠模型显示，血清ITGBL1与HBV DNA水平呈时间依赖性增长，肝组织免疫组化证实ITGBL1表达上调。

RUNX2在肝细胞中调控ITGBL1表达
基因共表达分析显示CHB患者肝组织中RUNX2与ITGBL1 mRNA水平显著相关。机制研究表明，RUNX2通过结合ITGBL1启动子-985至-978 bp区域增强其转录活性，shRNA敲低RUNX2可使ITGBL1表达降低60%。

HBV依赖RUNX2上调ITGBL1
HBV转染的Huh7细胞中，RUNX2抑制剂CADD522呈剂量依赖性抑制ITGBL1表达。值得注意的是，HBx和HBsAg均可激活ITGBL1启动子，但该效应可被维生素D₃阻断，提示病毒蛋白通过RUNX2间接调控。

HBV通过RUNX2/ITGBL1激活肝星状细胞
HBV转染的Huh7细胞条件培养基使LX-2细胞α-SMA和COL1A1表达升高2-3倍，而预处理维生素D₃可完全逆转该效应。

该研究首次阐明HBV-RUNX2-ITGBL1-TGF-β信号轴在肝纤维化中的级联调控机制。临床意义在于：①解释了维生素D缺乏与CHB不良预后的关联，血清25(OH)D₃水平可能作为预测指标；②提出联合RUNX2抑制剂与抗病毒治疗的新策略，尤其对HBeAg阴性患者更具价值；③为开发靶向ITGBL1的抗体药物提供理论依据。研究局限性在于尚未明确HBx/HBsAg调控RUNX2的具体通路，这将是未来研究方向。