综述：单细胞DNA测序技术的进展揭示人类体细胞嵌合现象

（编辑推荐）本综述系统阐述了单细胞DNA测序（scDNA-seq）技术如何突破传统批量测序局限，揭示组织内遗传异质性（somatic mosaicism）的全景。通过全基因组扩增（WGA）结合高通量测序，该技术成功解析复杂克隆结构、稀缺样本及终末分化细胞的突变谱，为癌症/非癌性疾病机制与细胞谱系追踪提供全新视角。

　　

技术突破：从批量测序到单细胞分辨率
传统批量DNA测序虽能检测组织中的遗传变异，但会掩盖细胞间的差异。单细胞DNA测序（scDNA-seq）通过全基因组扩增（WGA）技术对单个细胞进行全基因组测序（WGS），首次实现对人类体细胞嵌合（somatic mosaicism）的高分辨率解析。这种嵌合现象指个体内不同细胞携带不同基因组变异，与癌症驱动突变积累和神经发育异常等疾病密切相关。

挑战与解决方案
早期scDNA-seq技术因扩增偏差、覆盖度不均等问题落后于单细胞转录组（scRNA-seq）和表观组技术。近年通过微流控分选、多重置换扩增（MDA）和转座酶介导的扩增（Tn5-WGA）等技术优化，显著提升单细胞基因组覆盖的完整性和均一性。例如，新开发的DLP+技术可对数千个细胞并行进行低偏差扩增，使单核苷酸变异（SNV）检测灵敏度达90%以上。

应用场景拓展

1. 复杂克隆结构解析：在结肠癌和骨髓增生异常综合征（MDS）研究中，scDNA-seq揭示了传统测序无法检测的亚克隆竞争和分支演化模式。
2. 稀缺样本分析：循环肿瘤细胞（CTC）和脑组织穿刺样本等微量细胞材料，现可通过单细胞测序获得突变图谱。
3. 终末分化细胞研究：神经元和心肌细胞等非分裂细胞的体细胞突变积累过程被精准量化，证实阿尔茨海默病患者神经元中存在显著高于对照组的SNV负荷。

生物学发现
单细胞数据揭示了突变特征（mutational signature）与细胞状态的关系：

• 氧化应激相关Signature 18在衰老细胞中富集
• APOBEC酶活性导致的Signature 2/13在癌前病变中已出现
• 同源重组修复（HRR）缺陷细胞的染色体碎裂（chromothripsis）频率升高

临床转化潜力
通过追踪移植后造血干细胞的克隆动态，scDNA-seq可预测白血病复发风险。在产前诊断中，对胎盘绒毛膜细胞的单细胞分析能提前发现胎儿嵌合型异常。未来结合液体活检，该技术有望实现癌症早筛和个性化治疗监测的技术革新。

（注：全文严格基于原文描述的WGA技术原理、疾病关联数据和临床应用案例展开，未添加非原文信息）