猫慢性肾病早期诊断新突破：基于VAMS耳缘采样的肾小球滤过率精准评估技术

本研究针对猫慢性肾病(CKD)早期诊断难题，创新性地采用容积吸收微采样技术(VAMS)结合LC-MS/MS方法，实现了通过耳缘微量采血同步检测碘海醇(iohexol)和肌酐(creatinine)浓度，建立了毛细血管血与静脉血浆浓度的转换公式，临床验证显示94%和96%的数据差异<20%。该技术显著提升动物福利，为GFR测定提供了更便捷可靠的解决方案。

　　

猫慢性肾病(CKD)是临床常见的致命性疾病，尤其在老年猫中死亡率居高不下。当前诊断主要依赖血清肌酐和尿素等晚期指标，但它们在肾功能丧失超过75%时才会出现异常，导致错失早期干预时机。虽然国际肾脏兴趣协会(IRIS)强调早期诊断可显著改善预后，但金标准——肾小球滤过率(GFR)测量技术因需多次静脉采血而难以普及。传统方法不仅给猫带来应激痛苦，还面临样本运输和储存的挑战。

针对这一困境，比利时根特大学的研究团队Hanna De Baets、Marleen Brans等开展了一项开创性研究，提出用容积吸收微采样(VAMS)技术替代静脉采血。这种创新方法仅需从猫耳缘采集10μL毛细血管血，结合高灵敏度LC-MS/MS检测，成功实现了碘海醇和肌酐的双重定量。相关成果发表于《BMC Veterinary Research》，为动物医疗领域带来了兼顾精准性与伦理性的解决方案。

研究团队首先建立了同时检测血浆、全血和VAMS样本中碘海醇与肌酐的LC-MS/MS方法。关键技术包括：采用自动化提取流程处理VAMS样本，优化蛋白沉淀溶剂比例(75/25乙腈/甲醇)以克服种属差异；利用同位素标记肌酐-d₃作为替代分析物，通过29例血浆样本验证建立校正公式(y=-0.597+0.776x)；设计多中心临床验证试验，对23只猫进行静脉血、血浆与耳缘VAMS样本的配对分析。

方法验证结果显示：所有基质中分析物的准确度偏差<6%，总精密度CV<9.6%。VAMS样本在0.17-0.55 L/L血细胞比容(hct)范围内回收率稳定，满足EMA和FDA指南要求。稳定性实验证实样本可在室温保存1周，-80℃长期稳定达8个月。

临床验证发现：耳缘VAMS与静脉血浆的原始数据存在显著差异(碘海醇-55.1%，肌酐-21.2%)，但经hct校正和血/浆比(B/P)时间动态调整后，衍生公式使94%碘海醇和96%肌酐数据的差异<20%。值得注意的是，外源性肌酐给药后B/P比值呈现时间依赖性变化，在t₅至t₁₈₀分钟显著低于基线(t₀)。

应用研究在40只猫中验证了转换公式的普适性：碘海醇计算血浆浓度与实测值的平均偏差仅1.1%(95%CI -0.2至2.4)，肌酐偏差-3.5%(-4.5至-2.5)，且94-96%数据满足临床可接受标准。

这项研究首次在猫科医学中实现三大突破：建立VAMS耳缘采样技术标准，阐明肌酐动力学的时间依赖性特征，开发出无需静脉采血的GFR评估体系。其意义不仅在于提升诊断敏感性（可检测IRIS I-II期病变），更通过减少75%采血量践行了动物实验3R原则（减少、优化、替代）。未来该技术有望重塑猫CKD管理范式，使常规GFR监测成为临床实践的重要组成部分，为精准兽医学树立新标杆。