CARD9基因新型复合杂合突变致Phialophora americana感染的病例研究：揭示免疫缺陷与暗色丝孢霉病的新机制

本研究报道一例携带CARD9基因新型复合杂合突变（c.952-1G>A/c.184+5G>T）的暗色丝孢霉病患者，通过mNGS和WES技术明确Phialophora americana感染及遗传缺陷，发现患者IL-17、IFN-γ等细胞因子水平降低，经伏立康唑治疗有效。该研究为CARD9缺陷相关真菌感染的诊疗提供新依据，发表于《BMC Infectious Diseases》。

　　

在真菌感染领域，暗色丝孢霉病（Phaeohyphomycosis）因其致病菌——暗色真菌（Dematiaceous fungi）的特殊性和临床罕见性，一直是诊疗难点。这类真菌通过黑色素化细胞壁逃避免疫攻击，而宿主免疫关键分子CARD9（Caspase recruitment domain-containing protein 9）的缺陷更会大幅增加感染风险。尽管既往研究已发现CARD9突变与多种真菌感染相关，但关于Phialophora americana这一罕见病原体的报道极少，且不同突变位点导致的临床异质性尚未阐明。山东省立医院团队在《BMC Infectious Diseases》发表的这项病例研究，揭示了一例由新型CARD9复合杂合突变引发的Phialophora americana感染，为理解遗传性免疫缺陷与真菌易感性关系提供了新视角。

研究采用多学科技术联合作战：通过宏基因组下一代测序（mNGS）锁定病原体为Phialophora americana；全外显子测序（WES）发现患者携带CARD9基因两个未报道的剪接位点突变（c.952-1G>A和c.184+5G>T）；Western blot证实突变导致CARD9蛋白表达显著降低；细胞因子检测显示患者PBMCs经LPS刺激后IL-1β、IL-6、IL-17和IFN-γ分泌缺陷。

临床特征与诊断突破
患者长达10年的体癣复发史和近期右腋窝侵袭性皮下感染提示免疫异常。病理活检显示坏死组织中GMS染色阳性，真菌培养分离出灰色至黑色菌落，显微镜下可见典型瓶状分生孢子梗。mNGS技术克服传统培养局限，精准鉴定出Phialophora americana为主病原体，同时检出EBV等共感染微生物。

遗传机制解析
WES发现患者存在LRP5、NLRP1和CARD9三个潜在致病突变，但仅CARD9与真菌感染明确相关。新发现的c.952-1G>A突变影响内含子6剪接，而c.184+5G>T突变曾见于两例真菌感染病例。Western blot显示患者CARD9蛋白水平仅为父母的一半，证实突变导致功能缺陷。

免疫表型与治疗启示
患者Th17相关细胞因子IL-17分泌显著降低，与CARD9缺陷导致的CLRs（如Dectin-1/2/3）信号通路受损相符。初始两性霉素B治疗因肾毒性失败，换用伏立康唑后病灶显著消退。该案例补充了既往关于CARD9突变患者对伊曲康唑敏感的认知，提示伏立康唑可作为替代选择。

这项研究首次报道CARD9 c.952-1G>A突变与Phialophora americana感染的关联，拓展了CARD9缺陷的基因型-表型谱。其临床价值在于：①为不明原因反复真菌感染患者提供遗传筛查依据；②证实mNGS在罕见真菌诊断中的优势；③优化了暗色丝孢霉病的治疗策略。未来需进一步探索不同CARD9突变对CLRs信号通路的特异性影响，为精准免疫调节治疗奠定基础。